不同针灸配穴防治应激性胃溃疡大鼠的差异蛋白表达分析

胃溃疡大鼠模型采用捆绑加水浸应激的方法进行模型复制，各组大鼠依照分组各取不同的穴位。结果和结论：针刺足三里穴或针刺中脘穴以及针刺合募配穴（足三里穴配中脘穴）对应激性胃溃疡都有作用，但合募配穴效果优于单穴针刺，合募配穴效果具有一定的效应特异性。

关键词：应激性胃溃疡；合募配穴；蛋白表达

一、材料和方法

1.1实验动物

Wistar大鼠，CL级。雄性，体重200±30g，80只。根据随机数字表将80只大鼠随机分为8组：

A空白对照组；

B捆绑组；

C应激性胃溃疡模型组；

D募穴组（中脘穴组）；

E下合穴组（足三里组）；

F合募配穴组（中脘配足三里组）；

G俞募配穴组（中脘配胃俞组）；

H八脉交会穴组（内关配公孙组）。

1.2针刺治疗方法

取穴：“足三里”、“中脘”、“胃俞”、“内关”、“公孙”的选取参照大鼠常用针灸穴位定位标准。按照分组要求，各组大鼠依照分组所取穴位，下合穴组取“足三里”穴针刺，募穴组取“中脘”穴针刺，合募配穴组取“足三里”穴加“中脘”穴针刺，俞募配穴组取“中脘”穴加“胃俞”穴，八脉交会穴组取“内关”加“公孙”穴，模型组和捆绑组每日同样抓取，不针刺；空白对照组正常喂养，不予处理。定位及针刺深度：足三里穴取膝关节后外侧，腓骨下头5mm，直刺5-7mm；中脘穴取脐上30mm，直刺2mm；内关穴取前肢内侧，离腕关节3mm处，尺挠骨缝间，直刺1mm；胃俞穴取膀胱经胃之背俞穴，在第十二胸椎棘突下，旁开1.5mm，直刺2mm；公孙穴取第1跖骨基底部的前下方，直刺1mm。

针刺方法：采用平补平泻针法（均匀提插捻转的一种简单复式手法，其手法柔和,深透有力，均匀协调）治疗，每日1次，每次留针20分钟，每隔10分钟行针1次，连续施针2天。

二、分析

溃疡指数评定按照GUTH等方法进行分析。模型组与正常组溃疡指数比较具有显著性差异，提示造模复制良好；下合穴组、募穴组、俞募配穴组、八脉交会穴组与模型组比较有差异，合募配穴组与模型组比较有显著性差异，提示单纯针刺足三里穴或中脘穴以及俞募配穴治疗组和八脉交会穴治疗组对胃溃疡模型的治疗虽然能够起到一定的作用，但远远不及合募配穴组疗效明显。

用Bradford法对胃组织进行蛋白浓度测定应激性溃疡模型组与捆绑组比较蛋白浓度下降，与空白对照组比较蛋白浓度下降；针刺治疗组（募穴组、下合穴组、合募配穴组、俞募配穴组、八脉交会穴组）与模型组比较蛋白浓度上升。说明针刺治疗对大鼠胃组织蛋白浓度有一定的调节作用。

三、结果

在本实验各组大鼠中，模型组胃粘膜局部出现溃疡灶，数量较多，面积较大；针刺治疗各组均出现大小不等，数量不均的咖啡色的出血点，仔细观察可以发现该处粘膜缺损，可以认为是轻度溃疡，针刺治疗后溃疡程度较模型组有所减轻，表明针刺治疗有效，其中尤以合募配穴治疗疗效显著。通过对溃疡指数的分析也可以看出，足三里/中脘组与模型组比较有差异，合募配穴组与模型组比较有显著性差异，提示单纯针刺足三里穴或中脘穴对胃溃疡模型的治疗虽然能够起到一定的作用，但远远不及合募配穴组疗效明显，配穴治疗组（合募配穴组、俞募配穴组、八脉交会穴组）与应激性溃疡模型组比较有差异，其中合募配穴组差异较明显，提示针刺配穴对胃溃疡模型的治疗有作用，其中合募配穴组治疗效果更为明显。另外本实验中还观察到捆绑处理对溃疡大鼠胃组织亦有明显的影响，且与模型组大鼠胃组织蛋白点存在差异，这提示了捆绑加水浸刺激和单纯捆绑刺激存在明显差异。

四、讨论

足三里，是胃经“合”穴，足阳明经属胃络脾，又是胃之下合穴，“合治内腑”，“合主逆气而泄”，故足三里是治疗脾胃病的主穴，所以古人将其列入“四总穴歌”中，指出“肚腹三里留”，它具有调理脾胃、补中益气、通经活络、疏风化湿、扶正祛邪之功能。凡属脾胃功能失调所致的胃痛，呕吐，纳呆，腹胀，泄泻等证，取足三里穴健脾和胃可主治。现代医学研究证实，针灸刺激足三里穴，可使胃肠蠕动有力而规律，并能提高多种消化酶的活力，增进食欲，帮助消化；对胃溃疡患者，针刺足三里等穴多引起蠕动增强，幽门开放，排空加速，当胃弛缓时，针刺使收缩波加强，胃紧张时则使之弛缓。中脘为胃之募穴，腑之会穴，胃经的交会穴，可用治一切腑病，尤以胃的疾病为先，有疏利中焦气机、补益中气之功。

《难经·四十五难》^[6]：“腑会太仓。”太仓即指中脘穴。胃为水谷之海，六腑之大源，故名腑会。针刺中脘对胃肠功能有调整作用：如原来胃肠处于较弱或中等蠕动状态时，针刺中脘可使蠕动增强；如原来胃肠处于较强蠕动状态时，则这种作用不明显。当用弱刺激时，可促进胃蠕动；强刺激则产生抑制胃蠕动作用。针刺中脘对胃酸分泌也有一定作用。该穴传入神经元在脊神经节的节段为胸7～腰2，由于其神经传人节段与胃肠的传入神经节段在形态学上有所重迭交汇，因此针刺本穴能调整胃肠功能。

关于足三里穴和中脘穴的配伍，在《卫生宝鉴·虚中有热治验》卷五中^[7]，曾有一病案正应王叔和浮脉歌“脏中积冷荣中热，欲得生精要补虚”，故“先灸中脘，乃胃之经也，使引清气上行，肥腠理，又灸气海，乃生发元气，滋荣百脉，长养肌肉。又灸三里，为胃之合也，亦助胃气，撤上热，使大于阴分”。《医方类聚》中有治胃实、脾实方，亦皆用三里、中脘为其主穴治疗。

另外，《针灸大成》^[8]用此二穴相配，尚可治疗心胸病，翻胃吐食，哮吼嗽喘，健忘失记等症。后世针灸医家对此二穴的配伍应用较多，《针灸精粹》指出此二穴：“理胃病，兼治腹中一切疾病”，朱琏在《新针灸学》中总结为“中脘、足三里用来调理肠胃机能，止上吐下泻”^[9]。临床治疗一般先取足三里，以后看病情需要再取中脘，即原则先远取后近取。对缓解疼痛、和胃宽中有良好作用^[10]。

参考文献

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[9]吴修玉，马正军，苏金鹏，等．合募配穴针灸治疗中风后尿失禁疗效观察．中国医药研究，2004， 2（10）：14

[10]张红石，王富春．合募配穴与俞原配穴在脏腑辨证中的应用．中国针灸，2006，26（5）：378～