甲状腺微小乳头状癌中Galectin-3、CK19、HBME-1和CD56的表达及意义

　　甲状腺微小乳头状癌是指直径≤1 cm的甲状腺乳头状癌，常与结节性甲状腺肿并发，其形态学有时并不典型。目前的研究显示Galectin一3、CK19、一1在甲状腺乳头状癌的鉴别诊断中起重要作用 卅]，但其在结节性甲状腺肿或其他甲状腺乳头状增生疾病中仍会表达，因而对一些形态学不典型的甲状腺微4,-~L头状癌仍有必要继续寻找一些新的标记物。CD56作为一种神经黏附分子，可影响肿瘤的迁移。国外研究显示：CD56在甲状腺乳头状癌表达缺失，但在甲状腺增生性疾病则明显增强|5 ；另一些研究提示少部分甲状腺癌仍可表达CD56 71，国内尚未查及相关报道。
　　.3、CK19、HBME一1的研究主要集中于甲状腺乳头状癌，对于甲状腺微小乳头状癌的研究相对较少。为了进一步认识该疾病、减少误诊，我们收集了北大人民医院病理科2007～2009年10例结节性甲状腺肿合并微H,-~L头状癌的病例，分析Ga—一3、CK19、HBME一1和CD56的表达水平及其在鉴别诊断中的意义。
　　材料与方法.1 临床及病理资料按照病理诊断标准选取本院结节性甲状腺肿合并微4,-~k头状癌的病理标本例。其中男2例，女8例；年龄33～69岁，平均50岁。肿瘤组织直径从0.2—1 cm。标本均经％福尔马林固定，石蜡包埋。连续切片，切片厚～ 5 txm，常规HE染色。
　　.2 免疫组化染色及结果判断免疫组化采用法，多克隆抗体Galectin一3及单克隆抗体CK19、.1购自北京中杉金桥公司，单克隆抗体购自福州迈新公司。Galectin一3、CK19、HBME一1的阳性对照用诊断明确的甲状腺乳头状癌，CD56运用神经纤维作阳性对照。用PBS液代替一抗作为阴性对照。Galectin-3阳性信号为细胞质内出现棕黄色颗粒；CK19阳性信号为细胞质和细胞膜内出现棕黄色颗粒；HBME一1阳性信号为细胞膜和细胞质内出现棕黄色颗粒。CD56阳性信号为胞膜染色伴或不伴胞质染色。染色的评分方法：按阳性细胞数所占比例并参考着色强度分为：无明显阳性细胞为阴性（一），阳性细胞数<25％ 为弱阳性，阳性细胞数％ ～50％ 为中度阳性（++），阳性细胞数>50％ 为强阳性（卅）。
　　结果.1 临床及组织病理学特征 结节性甲状腺肿合并微小乳头状癌组织发生于中老年，女性明显多于男性。组织学上2例主要呈现乳头状结构，核呈毛玻璃状，可见核重叠、核沟及纤维瘢痕（图1）；5例组织学主要表现为腺样结构，核呈毛玻璃状，可见核重叠和核沟及纤维瘢痕；另3例组织学主要表现为乳头状或腺样结构，核增大，核的特征不明显，未见明显瘢痕形成。
　　.2 Galectin-3、CK19、HBME-1及CD56在甲状腺微小乳头状癌中的表达在甲状腺微小乳头状癌中9例Galectin一3呈中～重度阳性着色（图2），1例呈轻度阳性着色，阳性部位主要位于胞质，阳性率为％ ；而在结节性甲状腺肿中3例Galeetin一3呈轻度阳性着色，7例呈阴性表达（图3），其中炎细胞周围新生的滤泡上皮呈明显的阳性着色，阳性率为％ 。甲状腺微／J,~L头状癌中10例CK19呈中一重度阳性着色（图4），表达部位主要位于胞膜及胞质，阳性率为100％ ；在结节性甲状腺肿中6例呈阳性表达（图5），其中炎细胞周围新生的上皮呈明显阳性表达，阳性率为60％ 。甲状腺微小乳头状癌中例样本HBME1呈中一重度阳性着色（图6），仅有例呈轻度阳性着色，阳性部位为细胞膜及少部分胞质，阳性率为100％ ；结节性甲状腺肿中仅有1例一1呈轻度阳性着色，9例HBME一1表达阴性，阳性率为10％ 。甲状腺微小乳头状癌中2例呈轻度阳性着色，8例表达阴性，阳性部位主要为细胞膜，阳性率为20％ ，且阳性着色主要位于肿瘤组织与正常甲状腺组织交界处；而在结节性甲状腺中例呈中～重度阳性着色（图7），仅有1例呈轻度阳性着色，阳性率为100％ ；部分免疫组化结果总结见表1。3 讨论甲状腺微小乳头状癌是乳头状癌的亚型，分类中将其定义为直径≤1 cm的乳头状癌，因为体积小，在大体检查时常被漏掉。通常由于其它原因切除甲状腺标本或尸检中偶然发现。
　　甲状腺微d,-~L头状癌多见于女性，男女发病比例各家报道不一_8 ，大多在1：3左右，有的高达：9，本组病例男女之比约为1：4，与多数文献报道相一致。好发年龄一般在40—5O岁，本组平均年龄岁。肿瘤体积一般较小，本组最小的肿瘤直径仅.2 cm。因而在这一年龄段的女性结节性甲状腺肿患者一定要将甲状腺按书页状切开，多取材，同时在阅片时要仔细，谨防漏诊。
　　尽管文献报道甲状腺微小乳头状癌同样可以出现乳头状癌的特征，如毛玻璃状核、核内假包涵体和核沟等，但具备这些特征的典型甲状腺微小乳头状癌并不多见，为此需要一些辅助的方法来进一步明确诊断。本研究联合运用Galectin.3、CKI9、HBME.
　　、CD56检测其对甲状腺微小乳头状癌诊断的敏感性。Galectin一3是一种p一半乳糖苷结合蛋白，在调节细胞生长、黏附、凋亡和恶变等过程中发挥重要作用，在甲状腺微小乳头状癌的诊断中越来越受到重视。Laeo等 研究显示22例甲状腺微小乳头状癌中有19例是Galectin.3表达阳性，我们的研究结果提示l0例甲状腺微小乳头状癌中9例呈中～重度阳性着色。在结节性甲状腺肿中尽管10例标本中有3例Galectin一3呈阳性着色，但其表达水平多数为轻度阳性。我们的研究结果与Laco等的基本一致。
　　是一种低分子量的角蛋白，存在于正常上皮和一些上皮来源的肿瘤中。Laco等研究提示22例甲状腺微小乳头状癌中有13例CK19阳性，阳性率为％。我们的研究结果提示l0例甲状腺微小乳头状癌均呈中～重度阳性着色。在结节性甲状腺肿中尽管10例标本中有6例CK19呈阳性着色，但其表达水平多数为轻度阳性，仅有1例为中度着色。我们的研究结果提示CK19在结节性甲状腺肿中主要表现为轻度阳性着色，在甲状腺微小乳头状癌中则主要是中～重度阳性着色。HBME一1是间皮细胞表面微绒毛的1种抗原成分，在问皮瘤和某些腺癌细胞中有表达。研究显示HBME一1在甲状腺乳头状癌的阳性率为100％_l 。本研究显示甲状腺微小乳头状癌HBME一1的阳性率为100％ ，且主要为中～重度着色；结节性甲状腺肿的阳性率为10％ ，且主要为轻度着色，与文献报道的结果相符。CD56是一种神经黏附分子，可影响肿瘤的迁移。国外的一项研究对72例甲状腺乳头状癌进行CD56染色，结果提示CD56在所有病例中均呈阴性表达，而在良性甲状腺上皮则呈持续性阳性表达 。另一项研究显示在l5例甲状腺微fl,~L头状癌中6例CD56呈阴性表达 ，国内尚未查及相关报道。本研究提示％ 的甲状腺微tJ,~L头状癌CD56呈阴性表达。由这些结果可以看出，CD56在甲状腺乳头状癌及微小乳头状癌中各研究者的结果差异较大，这有待于扩大样本量做进一步研究。同时我们的研究结果提示例阳性标本其阳性部位均位于肿瘤组织与周围甲状腺组织的交界处，这与Scarpino等 的研究结果相似，可能与肿瘤的侵袭有关。
　　总之，目前某些甲状腺微小乳头状癌单凭形态学，其诊断有一定困难。免疫组化染色上述4种抗体的单一染色阳性或阴性对诊断意义不大。联合种抗体染色对甲状腺微小乳头状癌的诊断具有重要的提示意义。