HPLC法测定盐酸氟西汀分散片的含量

　　王素平,王昌锭,林丽珍 作者单位：海南三叶制药厂有限公司

　　【摘要】目的：探究用反相高效液相色谱法测定盐酸氟西汀分散片含量的具体方法。方法：采用反相高效液相色谱法，色谱柱为C18，流动相为乙腈-四氢呋喃-三乙胺磷酸缓冲液(体积比21:14:65)，流速1.0ml/min，检测波长226nm，测定盐酸氟西汀的含量。结果：盐酸氟西汀在3684g/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.9998)，平均回收率为100.3%(RSD=1.0%，n=9)，精密度(RSD)为0.6%(n=6)。结论：本法简便、快速、准确、灵敏，重现性好，适用于盐酸氟西汀分散片的含量测定。

　　【关键词】反相高效液相色谱法;盐酸氟西汀分散片;盐酸氟西汀;含量测定

　　【Abstract】Objective To establish a rapid RP-HPLC method for the determination of fluoxetine dispersible tablets.Methods RP-HPLC method was conducted with the column of C18,mobile phase of acetonitrile:tetrahydrofuran:triethylamine-phosphoric acid buffer(21:14:65),flow rate of 1.0ml/min,and fluoxetine was determined at wavelength of 226nm.Result In the concentration range of 36～84g/ml,the distribution of fluoxetine is linear(r=0.9998),the average recovery was 100.3%(RSD=1.0%,n=9) and the precision (RSD) was 0.6%(n=6).Conclution This method is simple,rapid,accurate and sensitive.It is suitable for the determination of fluoxetine dispersible tablets.

　　【Key Words】RP-HPLC，fluoxetine dispersible tablets，fluoxetine;Content determination

　　盐酸氟西汀为选择性5-羟色胺(5-HT)再摄取抑制剂，能选择性抑制中枢神经对5-羟色胺(5-HT)的重吸收，间接延长和增加5-HT的作用，改善和纠正精神抑郁和强迫状态，从而改善情感状态，治疗抑郁性精神障碍，是目前治疗抑郁症的首选药物。本文在文献[1-4]的基础上建立反相高效液相色谱测定盐酸氟西汀分散片的含量，操作简便，结果准确。

　　1.仪器与试药

　　日本岛津LC-10AVP高效液相色谱仪联用SPD-10AVP紫外分光检测器。盐酸氟西汀工作对照品;盐酸氟西汀分散片(海南三叶制药厂有限公司，批号为070101、070102、070103);四氢呋喃、乙腈为色谱纯;磷酸、三乙胺为分析纯。

　　2.方法与结果

　　2.1色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：C18(伊利特，4.6μm×200mm)，流动相：乙腈-四氢呋喃-三乙胺磷酸缓冲液(取三乙胺8ml，加磷酸4ml，加水至1000ml，用磷酸或三乙胺调节pH值至5.8)(21:14:65)，流速为1.0ml/min，检测波长为226nm。按上述色谱条件进样，氟西汀峰的理论塔板数为2162.7，与相邻峰的分离度为4.561。

　　2.2溶液的制备 对照品溶液：取经105℃干燥至恒重的盐酸氟西汀对照品约12mg,精密称定,置100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度(作贮备液),精密量取5ml置10ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得。

　　供试品溶液：取片重差异项下的片，研细，精密称取适量(相当于氟西汀50mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，振摇使充分溶解，过滤，精密量取续滤液5ml，置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

　　空白辅料溶液：按处方比例称取本品辅料混合粉适量，照供试品溶液配制方法配制溶液。

　　2.3 干扰试验 取对照品溶液、供试品溶液、空白辅料溶液各20μl注入液相色谱仪，结果辅料对含量测定无干扰。

　　2.4 检测限与定量限 取盐酸氟西汀对照品用流动相配制成一定浓度，再逐级递减稀释成含氟西汀分别为0.12、0.012μg/ml的溶液，各取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。经测定，氟西汀检测限为0.2ng,定量限(按检测限3倍计)为0.6ng。

　　2.5 精密度试验 取2.2项下对照品溶液重复进样6次，每次进样20μl，记录峰面积，结果平均峰面积为2361647，RSD=0.6%，表明分析方法精密度好。

　　2.6 线性试验 精密量取2.2项下对照品贮备液3ml、4ml、5ml、6ml、7ml,分别置10ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。分别取20μl注入液相色谱仪,记录色谱峰面积。以对照品溶液浓度(C)为横坐标,氟西汀峰面积(A)为纵坐标作线性回归,得回归方程A=1995928.8C+63111.9,r=0.9998。结果表明盐酸氟西汀在36～84μg/ml浓度范围内线性关系良好。

　　2.7 重复性试验 精密称取070101批样品6份,按2.2项下供试品溶液的配制方法配制,各进样20μl测定含量,结果盐酸氟西汀平均峰面积为2320101.0,RSD=0.6%,表明分析方法重复性好。

　　2.8溶液稳定性试验 将配置好的同一份供试品溶液(070101批),放置在室温下,分别于第0、2、4、6、8小时取样测定,结果平均峰面积为2361426.4,RSD=0.24%,供试液在室温条件下8h内稳定。

　　2.9 回收率试验 分别取盐酸氟西汀对照品适量(约相当于盐酸氟西汀44mg、55mg、66mg)各三份，精密称定，分别加入处方比例辅料，按2.2项下供试品溶液配制后测定，结果平均回收率为100.3%，RSD=1.0%，表明本法的回收率良好。见表1。

　　表1 盐酸氟西汀分散片回收率试验测定结果

　　2.10供试品的测定 分别精密量取对照品溶液和3批供试品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算氟西汀含量。

　　3 讨论

　　3.1 依据国家药品标准“盐酸氟西汀质量标准[YBH13992005]”[5]中含量测定，原标准中用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂，但试验过程中发现基线易波动，峰形不理想，参考相关文献[1-4]，改用十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱，结果峰形较好。

　　3.2 采用反相高效液相色谱法测定盐酸氟西汀分散片的含量，方法准确、灵敏、可靠，可作为该制剂含量测定的检测方法。

　　参考文献

　　[1]徐远,狄平平,宓一英,等.盐酸氟西汀及胶囊剂含量的HPLC测定研究[J].中国现代应用药学,1997,14(2):34-35.

　　[2]陈桂良,徐新元,宓一英,等.HPLC法测定盐酸氟西汀的有关物质及其胶囊的含量[J].药物分析杂志,1997,17(5):310-313.

　　[3]杨继红,宋琪文,郑志昌,等.高效液相色谱法测定盐酸氟西汀胶囊含量[J].中国药物应用与监测,2004,3:52-53.

　　[4]李玲,袁波,朱荣申,等.高效液相色谱法检测抑郁症患者血清中氟西汀的浓度[J].中国药学杂志,2002,37(11):855.

　　[5]国家药品标准.盐酸氟西汀质量标准[YBH13992005].