核因子-κB和细胞间粘附因子-1的水平变化与胎膜早破的关系

　　[摘 要]目的　探讨母血、羊水、脐血中核因子-κBp65(NF-κB p65)及细胞间粘附因子-1(IACM-1 )的水平变化与胎膜早破发病的关系。方法　采用双抗体夹心酶联免疫吸附法,动态检测62例胎膜早破患者(胎膜早破组)及46例正常孕妇(对照组)的母血、羊水、脐血中NF-κB p65及IACM-1的水平,同时进行胎膜组织的病理检查,对合并绒毛膜羊膜炎的患者也进行相应的NF-κB p65及IACM-1的水平检测。结果　PROM组母血、羊水、脐血中NF-κB p65和IACM-1的含量均高于对照组(P< 0.05)。绒毛膜羊膜炎患者的母血、脐血、羊水中NF-κB p65水平明显高于非绒毛膜羊膜炎患者，两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论　NF-κB p65及IACM-1的水平检测可作为一种新的生物学标志物用于胎膜早破并绒毛膜羊膜炎感染的诊断。

　　[关键词]：核因子-κBp65;细胞间粘附因子-1;胎膜早破;绒毛膜羊膜炎

　　Clinical significance of Nuclear Factor-κB and intercellular adhesion molecule-1 in patients with preterm premature rupture of membranes. TIAN Li,Wu Feng-zhi (Department of Gynaecology and Obstetrics, The First Affiliated Hospital of Ji Shou University,. Ji Shou 416000,China)

　　Abstract: Objective: Investigate the clinical significance of nuclear factor-κB p65(NF-κB p65) and intercellular adhesion molecule-1(IACM-1) in patients with preterm premature rupture of membranes (PROM) and chorioamnionitis. Methods: The levels of NF-κB p65 and IACM-1 were detected by enzyme linked immunosorbent assay in maternal serum, amniotic fluid, umbilical cord serum of 62 pregnant women with PROM and 46 women with normal pregnancy. Every embryolemma was histopathologically confirmed after delivery. Results: The levels of NF-κB p65 and IACM-1 in maternal serum, amniotic fluid, umbilical cord serum of PROM were respectively significantly higher in patients with PROM than those of the control group (P<0.05). The levels of NF-κB p65 and IACM-1 in maternal serum, amniotic fluid, umbilical cord serum in chorioamnionitiswere higher than those in non-chorioamnionitis(P<0.05).Conclusion:The levels of NF-κB and IACM-1 concent rations in maternal serum,amniotic fluid, and umbilical cord serum is a useful biomarker for identifying the chorioamnionitis and predicting premature rupture of membrance .

　　Key words:nuclear factor-κB p65;intercellular adhesion molecule-1;premature rupture of membranes; Chorioamnionitis

　　胎膜早破(PROM)作为产科常见的并发症。PROM发生的主要原因是细菌、病毒、支原体等所致的绒毛膜羊膜炎,胎膜结构被破坏,使胎膜薄弱处发生破裂。尽管对PROM发生的原理研究颇多,可确切原因还不清楚，感染是PROM 的重要发病因素之一[1]。本研究旨在探讨NF-κB和IACM-1与PROM及绒毛膜羊膜炎的关系。

　　1 资料和方法

　　1.1 一般资料：选择2008年1月～2010年6月,在本院妇产科住院的足月初产胎膜早破患者62例为胎膜早破组,平均孕周为37.4±2.8周,平均年龄为28.1±4.5岁。选取同期住院有剖宫产指征而行选择性剖宫产的正常妊娠妇女46例为对照组,平均孕周为38.1±2.1周,平均年龄27.3±2.7岁。两组孕妇均无母体疾病、无其他产科并发症及胎儿、胎位异常。

　　1.2诊断标准：胎膜早破诊断标准 参照乐杰主编的第7版《妇产科学》。

　　1.3标本处理及NF-κB p65、ICAM-1的检测:胎膜早破组患者在确诊后,用无针头注射器抽取羊水5ml;对照组孕妇在剖宫产暴露胎膜后用注射器抽取羊水5 mL。所得羊水均经离心5 min(3000 r/min)后留取上清待测;胎儿娩出后抽取脐血5 mL,分离血清待测。所有孕妇均于分娩前抽取肘静脉血3 mL,离心处理后留取血清待测。所有标本均在-70℃保存。NF-κB p65、IACM-1水平测定采用双抗体夹心酶联免疫吸附法,试剂盒由北京中杉金桥生物技术有限公司提供的ELISA试剂盒。两组孕妇均在产后取胎膜2 cm×2 cm,10%甲醛固定送病理学检查绒毛膜羊膜炎。

　　1.4统计学方法:所有资料用10.0SPSS统计软件进行统计处理,结果以 ±s表示,P< 0.05表示差异有统计学意义。

　　2 结果

　　两组孕妇血清、羊水及脐血中NF-κB p65、IACM-1水平比较 胎膜早破组母血、羊水、脐血中NF-κB p65、IACM-1的水平均高于对照组(P<0.05)。见表1。

　　绒毛膜羊膜炎患者母血、羊水、脐血中的NF-κB p65、IACM-1的水平变化 绒毛膜羊膜炎患者母血、羊水、脐血中的NF-κB p65、IACM-1水平明显高于非绒毛膜羊膜炎患者(P<0.05)。见表2。

表1　两组孕妇母血、羊水及脐血中NF-κB p65、IACM-1水平比较(ng/L, ±s)

组别        例数           母血                    羊水                    脐血

                NF-κB p65      IACM-1       NF-κB p65      IACM-1    NF-κB p65     IACM-1

胎膜早破组      62   365.14±98.21^①    32.55±11.35^②    456.87±123.44^①   58.73±14.93^② 113.47±69.52^①   21.24±7.31^②

对  照  组     46  156.74±73.65     18.67±9.74      226.66±99.17    29.55±10.69    69.75±32.18    14.64±5.67

注:与对照组比较, ^① P < 0.05，^②P < 0.01

表2　绒毛膜羊膜炎患者母血、脐血及羊水中NF-κB p65、IACM-1水平比较(ng/L, ±s)

组别         例数         母血                    羊水                       脐血

                NF-κB p65     IACM-1    NF-κB p65       IACM-1       NF-κB p65     IACM-1

绒毛膜羊膜炎   21   674.36±189.69^①  39.55±14.89^②   1089.54±612.32^①   45.55±15.65^②    278.31±89.45^①   26.58±9.69^②

非绒毛膜羊膜炎 87    313.89±99.37   19.55±12.87   425.57±202.38     29.55±11.56     114.77±49.29    17.15±7.26

注:与对照组比较, ^①P < 0.05，^②P < 0.01

　　3 讨论

　　NF-κB是多条信号转导通路的汇聚点,静息状态下,NF-κB存在于细胞浆与κB抑制蛋白(IκB)组成复合物,以无活性状态存在,细胞受到外界因素刺激时,I-κB发生磷酸化并被降解,暴露出核定位信号,NF-κB随之进入核内,与靶基因结合,调控细胞因子、粘附分子和炎性反应相关的酶及蛋白质的基因表达,直接参与脏器的损伤。病理状态下,细胞因子可以导致胎膜早破、早产、新生儿神经损伤、脑瘫、坏死性小肠结肠炎及慢性肺疾病等[2]。有研究发现PROM组胎膜组织中NF-κB表达明显高于对照组孕妇,患有绒毛膜羊膜炎组胎膜NF-κB表达明显高于非绒毛膜羊膜炎组[3]。本研究中发现NF-κB在胎膜早破孕妇的血清、羊水及脐血中的水平明显高于对照组,且明显高于非绒毛膜羊膜炎组(P<0.01)，与以往研究一致。提示NF-κB参与胎膜早破和绒毛膜羊膜炎的发病机制。

　　IACM-1是细胞黏附分子家族的重要成员,跨膜表达于血管内皮细胞上[4，5]。ICAM-1的生理作用不仅是调节细胞、细胞间以及细胞和基质间的黏附作用,而且参与细胞的信号传导、免疫炎性反应等一系列的生理和病理过程。Winkler[6]研究足月分娩与早产孕妇发现，与正常组对照，早产组中，孕妇子宫下段的血管内皮细胞中ICAM-1表达明显增加。炎症改变组织、血管和胎盘绒毛血管屏障的通透性，与感染相关的ICAM-1很快进入母体血流，其血清含量明显增加[7]。本研究中发现ICAM-1在胎膜早破孕妇的血清、羊水及脐血中的水平明显高于对照组,且明显高于非绒毛膜羊膜炎组(P<0.05)。提示ICAM-1参与胎膜早破和绒毛膜羊膜炎的发病机制。

　　通过本研究，我们认为母血、羊水、脐血中NF-κB和VCAM-1含量变化,对胎膜早破和绒毛膜羊膜炎有预测价值,且可在亚临床水平对羊膜腔感染进行诊断，为临床处理提供可靠的依据，从而降低产妇和围生儿的发病率。

　　4 参考文献

　　[1] Menon R , Fortunato SJ . Infection and the role of inflammation in preterm premature rupture of the membranes [ J ] . Res Clin Obstet Gynaecol , 2007 , 21 : 491-504.

　　[2] Van Osch GJ, Van Der Veen SW, Burger EH et al .Chondrogenic potential of in vitro multiplied rabbit perichondrium cells cultured in alginate beads in defined medium. Tissue Engineering , 2000, 6 (4) : 321

　　[3] Lappas M, Riley C, Greg E.et al.Increased expression of ac-FoxO1 protein in prelabor fetal membranes overlying the cervix:possible role in human fetal mem2brane rupture [J] . Reproductive Sciences , 2009 , 16 :635 2 641.

　　[4] Hallgren J,Jones TG, Abonia J P, et al.ulmonary CXCR2 regulates VCAM-1 and antigen-induced recruitment of mast cell progenitors[J].Proc Natl Acad Sci USA,2007,104 (51):20478-20483.

　　[5] Lee HM,Kim HJ,Won KJ,et al.Soluble form of vascular cell adhesion molecule 1 induces migration and proliferation of vascular smoot h muscle cells[J]. J Vasc Res , 2008,45(3):259-268.

　　[6] Winkler M，Kemb B，Fischer DC,et al. Expressionof adhesion molecules in the lower uterine segmentduring term and preterm parturition [J].Microsc Res Tech,2003,60(3): 430- 444.

　　[7] Makgoba MW,Sanders ME,Ginther GE.et al.Functional evidence that ICAM-1 is a ligand for LFA- 1 in cytotoxic T cell recognition [J].Eur J Immunol,1998，18：637-641.