COX-2、Ki-67在胃癌发生发展中的表达及其相关性研究

　　作者：朱艳丽1，刘 亮2，崔 颖1，王艳凤1，宋文玲1〖〗 作者单位：(1.佳木斯大学附属第一医院，黑龙江佳木斯 154003;2.佳木斯市肿瘤医院，黑龙江 佳木斯 154007)

　　【摘要】 目的：研究胃癌组织和正常胃黏膜中COX-2、Ki-67的表达情况，探讨它们在胃癌发生　　发展中的作用及其相关性。方法：应用免疫组化SABC法。结果：①胃癌组织COX-2蛋白、Ki-67蛋白阳性表达率高于正常胃黏膜组织(P<0.05)。②随着胃癌浸润深度的增加、分化程度的降低、淋巴结转移的出现COX-2及Ki-67阳性表达率升高(P<0.05)。③在胃癌组织中COX-2与Ki-67的表达呈正相关(rs=0.390,P<0.05)，均呈升高趋势。结论:COX-2、Ki-67均参与胃癌的发生和发展，二者可成为判断胃癌恶性程度有价值的指标,也可成为预后评估的指标。

　　【关键词】 胃癌; COX-2; Ki-67; 免疫组化; 相关性

　　Abstract: Objective： To discuss the role of the expression of COX-2 and Ki-67 inthe occurrence and development of gastric carcinoma and normal gastric mucosa aswell as their correlation.Methods：Immunohistochemical SABC method was used.Results：①The positive expression of COX-2 and Ki-67 in gastric carcinomawas higher than that in normal gastric mucosa(P<0.05). ②The positive expressionrates of COX-2 and Ki-67 increased with infiltration depth increasing, differentiation degree decreasing and lymphatic metastasis appearing(P<0.05).③There wasa positive correlation between COX-2 expression and Ki-67 expression in gastriccarcinoma(rs=0.390,P<0.05),the expression of both showing a going up trend.Conclusion：Both COX-2 and Ki-67 are participate in the occurrence and development of gastric carcinoma. The positive expression of COX-2 and Ki-67 can be used as valuable index to distinguish the degree of malignancy and the prognosis ofgastric carcinoma.

　　Key words: gastric carcinoma; COX-2; Ki-67; immunohistochemistry; correlation

　　原发性胃癌(primary gastric carcinoma PGC)是最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁人类的健康。目前认为它是一个多因素参与的多种环节的复杂过程，其中包括无数致癌因子的协同作用，深入探讨它们在胃癌中各自的作用机制及相互之间的联系，将对进一步阐明和阻断肿瘤的形成、转移具有重要价值。本研究通过观察COX-2 和Ki-67在胃癌组织及正常胃黏膜组织中的表达，以及在胃癌组织中的表达与胃癌临床病理因素的关系，探讨它们在胃癌发生发展中的作用及其相关性，从而为判断预后、指导临床治疗提供实验及理论依据。

　　1 材料与方法

　　1.1 标本来源

　　收集2008—09~2010—06佳木斯大学附属第一医院经病理组织学证实并行手术切除的胃癌石蜡标本54例，男30例，女24例，平均年龄56.4岁(38~76岁)，肿瘤大小：≤5cm 34例，>5cm 20例;肿瘤部位：上段及中段21例，下段33例;肿瘤分化：高、中分化41例，低分化13例;侵及浆膜及浆膜以外者19例，未侵及浆膜者35例(其中侵及黏膜2例，侵及肌层33例);有淋巴结转移23例，未见淋巴结转移31例; 另取胃镜检查组织学相对正常的胃黏膜20例作为正常对照组，入选病例术前未进行化疗或放疗，无长期使用非备体类抗炎药和糖皮质激素类药物史。

　　1.2 主要试剂

　　COX-2、Ki-67单克隆抗体，购自武汉博士德生物工程有限公司。

　　1.3 试验方法

　　免疫组化SABC法。

　　1.4 结果判断

　　COX-2蛋白的表达主要定位于胞浆，阳性细胞呈黄色或棕黄色颗粒，弥漫性或局灶性分布;Ki-67蛋白的表达主要定位于胞核，阳性细胞呈棕色颗粒。高倍镜下取5个不同视野各计数100个细胞，首先按COX-2 、Ki-67阳性细胞所占百分比进行评分：0～10%为0分，11%～24%为1分，25%～49%为2分，50%～74%为3分，≥75%为4分。同时对染色强度进行评分：无染色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。两者相加为最终免疫组化结果：0～1分为阴性，2～3分为弱阳性(+)，4～5分为阳性(++)，6～7分为强阳性(+++)。

　　1.5 病理组织学诊断标准

　　按1990世界卫生组织(WHO)分类诊断标准，经两位病理专家认定胃癌的分化和浸润深度。

　　1.6 统计学处理

　　应用SPSS16.0统计软件包分析两独立样本率的差异及配对资料率的相关性，其中两独立样本率的差异用χ2检验，配对资料的相关性用直线相关分析，P<0.05为差异有显著性。

　　2 结果

　　2.1 COX-2、Ki-67在正常胃黏膜和胃癌组织中的表达

　　见表1。 表1 COX-2、Ki-67在正常胃黏膜和胃癌组织中的表达

　　2.2 COX-2、Ki-67在胃癌组织中的表达情况与临床病理特征的关系〖HT5”，6”H〗表2 COX-2、Ki-67在胃癌组织中的表达情况与临床病理特征的关系

　　2.3 COX-2、Ki-67蛋白在胃癌中表达的相关性

　　见表3。表3 COX-2、Ki-67蛋白在胃癌中表达的相关性

　　3 讨论

　　胃癌的发生、发展是一个十分复杂的过程。现已有资料表明COX-2、Ki-67两者参与了胃癌的发生发展。COX是前列腺素(PG)合成过程中的关键酶，在正常组织细胞中不表达或低表达，但在发生炎症和肿瘤时，其表达水平迅速上调[1]。COX-2主要通过促进细胞增殖，抑制细胞凋亡，增强肿瘤浸润转移能力，促进新生血管形成等机制参与肿瘤的发生和发展过程[2]。Ki-67是一种人类增殖细胞核抗原，通过测定肿瘤细胞Ki-67的表达，可以了解肿瘤细胞的增殖情况。本实验发现胃癌组织中COX-2、Ki-67表达明显高于正常胃黏膜组织(P<0.05)。此外，进一步的研究发现，随着肿瘤浸润深度的增加、分化程度的降低、淋巴结转移的发生，COX-2、 Ki-67的阳性表达率也随之升高。本实验研究结果经Spearman等级相关分析显示，COX-2和Ki-67呈明显的正相关(rs=-0.390,P<0.05)。而Ki-67是人类增殖细胞核抗原，这样的结果提示我们COX-2可能具有促进肿瘤细胞增殖的作用。综合以上资料我们总结出：COX-2、Ki-67同时参与胃癌的发生，它们与肿瘤的恶性程度有明显相关性;同时，COX-2、Ki-67还促进胃癌的发展，它们与肿瘤的侵袭转移密切相关。因此联合检测两者在胃癌中的表达情况及其与胃癌临床病理因素的关系，可以判断胃癌的进展情况，同时也可以指导临床治疗工作。但是具体COX-2对Ki-67的上调作用是通过哪些作用机制，也是有待深入研究所要解决的问题。

　　【参考文献】

　　[1]郜恒郡，于连珍，孙亮，等.胃癌及癌旁组织中基因蛋白的表达[J].世界华人消化杂志，2000,8:578579

　　[2]Dempke W,Rie C,Grothey A,et al.Cyclooxygenase-2:anovel target for cancer chemotherapy[J].Cancer Res