高迁移率蛋白-1水平变化与脓毒症患者死亡率的关系

作者：马玉东1，黎明新2，孙宝山1，宋岩1 作者单位：(1.沈阳医学院奉天医院ICU，辽宁 沈阳 110024;2.检验科)

　　【摘要】 目的：研究脓毒症患者血清高迁移率蛋白-1( HMGB-1)水平变化，及其与死亡率的关系。方法：测定48例脓毒症患者血清HMGB-1的变化并记录患者转归。结果：随着治疗时间的增加，死亡组和存活组患者血清HMGB-1水平均逐渐上升，在24 h时，两组患者HMGB-1水平无明显差异;于72 h达高峰，死亡组患者血清HMGB-1水平明显高于存活组患者HMGB-1水平(P<0.01);当患者血清HMGB-1≥100 μg/L时，患者的死亡率将明显升高。结论：血清HMGB-1水平变化可以预测脓毒症患者的预后，当患者血清HMGB-1≥100 μg/L时，患者的死亡率将明显升高，临床应及早给予干预。

　　【关键词】 高迁移率蛋白-1;脓毒症;死亡率

　　AbstractNFDEAObjective：To study the serum levels of high mobility group protein box-1 (HMGB-1)in patients with sepsis，and the relationship between the serum HMGB-1 concentration and the mortality rate.Methods：The serum HMGB-1 levels of patients with sepsis were determined.The clinical outcomes in those patients were recored and analysed.Results：Along with treatment time enlongation， the serum HMGB-1 levels of both death group and survival group were increased gradually and peaked at 72 hours after the onset of the disease.There was no significant difference in the serum HMGB-1 levels of these two groups at 24 hours.The serum HMGB-1 levels of death group were much higher than those of survival group (P<0.05).The mortality rate significantly increased when the serum HMGB-1 concentration was higher than 100 μg/L.Conclusion：The serum HMGB-1 levels could be used to predict the prognosis of patients with sepsis.Early clinical intervention should be considered for patients with sepsis in order to reduce the mortality rate in patients with high serum HMGB-1 level.

　　Key wordsNFDEAhigh mobility group protein box-1; sepsis; mortality rate

　　脓毒症(sepsis)指由感染引起的全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)，多可证实有细菌或高度可疑感染灶存在，是各种严重烧伤、创伤、休克及外科手术后严重的并发症，进一步发展可导致脓毒性休克、多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome ， MODS)。目前脓毒症的抢救成功率仍未达满意效果，已成为临床危重患者最主要的死因之一。高迁移率蛋白-1(high mobility group protein box-1， HMGB-1)作为晚期炎症介质，在脓毒症的发展、转归及预后方面扮演着重要角色。本研究从临床角度出发，通过检测脓毒症患者血清HMGB-1水平变化和死亡率的关系，以指导临床治疗。

　　1 资料与方法

　　1.1 临床资料

　　2008年1月至2009年12月在我院ICU共收治脓毒症患者48例，平均年龄49.3岁，男32例，女16例，其中外伤23例(断肢再植10例，脑外伤4例，复合外伤9例，共死亡14例)，感染12例(肺内感染8例，泌尿系感染4例，共死亡7例)，手术术后8例(胰腺炎术后5例，结肠癌术后2例，胃癌术后1例，共死亡3例)，心肺复苏术后5例(死亡3例)。

　　1.2 标本采集

　　患者2 h 、12 h 、24 h 、48 h 、72 h 取外周静脉血3ml，迅速在离心机上分离血清，置于-80 ℃冰箱保存，统一测定HMGB-1并记录患者转归(生存或死亡)。

　　1.3 HMGB-1测定

　　人HMGB-1酶联免疫分析试剂盒，由沈阳金标准生物制品有限公司提供。方法：用纯化的HMGB-1抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入HMGB-1，再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的HMGB-1呈正相关。用酶标仪在450 nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算样品中HMGB-1浓度。

　　1.4 统计学分析

　　使用SPSS 13.0软件进行统计学处理，计量资料以(±s)表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 不同时间脓毒症患者HMGB-1水平变化

　　随着时间的增加，两组患者血清HMGB-1水平逐渐上升，于72 h 达高峰(图1)。图1 不同时间脓毒症患者HMGB-1水平变化

　　2.2 存活组和死亡组患者HMGB-1水平变化

　　死亡组患者血清HMGB-1水平在2 h、12 h、48 h、72 h明显高于存活组患者HMGB-1水平(P<0.01);在24 h 时，两组患者HMGB-1水平无明显差异(表1)。当患者血清HMGB-1≥100 μg/L时，患者的死亡率将明显升高(表2)。表1 不同时间脓毒症患者血清HMGB-1水平变化

　　3 讨论

　　近年来的研究发现，一种在炎症晚期释放的炎症介质HMGB-1在脓毒症的发展、转归及预后方面扮演着重要角色[1， 2]。HMGB-1因其分子量小，凝胶电泳时泳动的速度快而得名， 是细胞核内含量最丰富的非组蛋白染色质蛋白，正常人血清HMGB-1含量为阴性。HMGB-1作为一种免疫炎症分子， 参与并调节内生性和适应性免疫反应， 能够促进免疫细胞的成熟分化以及炎性介质的释放[3， 4]。HMGB-1是脓毒症致死效应中发挥关键作用的细胞因子，其促炎作用的关键在于其核内的DNA结合蛋白被活化的巨噬细胞 /单核细胞释放到细胞外， 从而发挥一系列炎症效应[5]，这种释放大多与LPS、 TNF -α、IL - 1β等刺激有关，也能被坏死细胞直接释放， 但凋亡细胞并不直接释放HMGB-1[6]。

　　研究结果表明，HMGB-1作为晚期炎性介质，在脓毒症患者存在逐渐上升的趋势，在72 h达高峰。死亡组患者血清HMGB-1水平在2 h、12 h、24 h、48 h、72 h明显高于存活组患者HMGB-1水平，说明HMGB-1水平与患者病情关系密切，并且当患者血清HMGB-1≥100 μg/L时，患者的死亡率将明显升高。

　　虽然有实验表明，在体外实验和动物实验中采用抗HMGB-1抗体、抗A-Box抗体、抗 RAGE抗体等治疗可显著抑制细胞外HMGB-1水平，明显提高脓毒症大鼠的生存率，但其能否应用于脓毒症的临床治疗尚不清楚[7， 8]。在临床中，通过检测血清中HMGB-1，可以尽早的判断患者的预后，以便尽早的给予临床干预，对于脓毒症患者何时及怎样应用抗 HMGB-1抗体等，有待于进一步研究。

　　【参考文献】

　　[1]Wang H， LiW， Goldstein R， et al.HMGB-1 as a potential therapeutic target [J].Novartis Found Symp， 2007， 280： 73-85.

　　[2]邵义明，姚华国，梁小仲，等.高迁移率族蛋白 B1表达水平与大鼠脓毒症严重程度及预后关系的实验研究 [J].中国危重病急救医学， 2006， 18 (11)： 668-672.

　　[3]Kim JB， Sig Choi J， Yu YM， et al.HMGB-1， a novel cytokine-like mediator linking acute neuronal death and delayed neuroinflammation in the postischemic brain[J] .J Neurosci， 2006， 26(24)： 6413-6421.

　　[4]Yamada S， Maruyama I.HMGB-1， a novel inflammatory cytokine[J] .Clin Chim Acta， 2007， 375(1-2)： 36-42.

　　[5]Angus DC， Yang L， Kong L， et al.Circulating high-mobility group box 1 (HMGB-1)concentrations are elevated in both uncomplicated pneumonia and pneumonia with severe sepsis [J]. Crit Care Med， 2007， 35 (4)： 1061-1067.

　　[6]Jiang W， Bell CW， Pisetsky DS. The relationship between apoptosis and high-mobility group protein 1 release from murine macrophages stimulated with lipopoly saccharide or polyinosinic-polycytidylic acid [J].J Immunol， 2007， 178 (10)： 6495-6503.

　　[7]Jonas SC， Anna NT， Carl JT.The role of high mobility group box-1 protein in severe sepsis[J].Curr Opinion Infec Dis， 2006， 19 (3)：231-236.

　　[8]Coffey JC， Wang JH， Kelly R， et al .Tolerization with BLP down-regulates HMGB-1 a critical mediator of sepsis-related lethality [J].J Leukoc Biol， 2007， 82 (4)： 906-991.