CD7阳性急性单核细胞白血病的骨髓特征观察

作者：尹 红1**， 鞠少卿2*** 作者单位：(南通大学附属医院1血液病研究室， 2检验科， 南通 226001)

　　【摘要】 目的：观察分析CD7+的急性单核细胞白血病的骨髓象特征。方法：结合细胞形态学、细胞化学染色和免疫分型的方法，回顾82例急性单核细胞白血病患者的骨髓象，分析CD7+急性单核细胞白血病患者的骨髓象特征。结果：82例急性单核细胞白细胞患者中，18例表达CD7抗原，占22.0%。CD7+急性单核细胞白血病患者的骨髓增生程度偏低，巨核细胞数量偏少，白血病细胞过氧化物酶染色(POX)阳性率偏低，差异有统计学意义(P<0.05)。CD7+急性单核细胞白血病原始细胞胞核折叠明显，胞浆量较少。结论：与CD7-的急性单核细胞白血病相比，CD7+急性单核细胞白血病细胞更加原始，形态上具有T淋巴细胞的部分特征。

　　【关键词】 急性单核细胞白血病;CD7;骨髓特征

　　[Abstract] Objective: To investigate the characteristics of the bone marrow features in CD7 positive acute monocytic leukemia(CD7+-AML). Methods: A total of 82 cases of acute monocytic leukemia were reviewed. The characteristics of the bone marrow cell morphology in CD7 positive acute monocytic leukemia were analyzed, combined with the methods of cell morphology, cell chemical staining and immunophenotype. Results: Among 82 cases of acute monocytic leukemia, 18 cases expressed CD7 antigen, accounting for 22.0%. It was found that in CD7+ acute monocytic leukemia the proliferation of bone marrow was reduced and the amount of megakaryocytes was lessened. Positive rate of peroxidase staining (POX staining) was significantly lower. These differences had statistical significance(P<0.05). The nucleus in leukemia cells of CD7+ acute monocytic leukemia were more folded than those in the cells of CD7- acute monocytic leukemia. Meanwhile, the amount of cytoplasm was also lessening. Conclusion: Compared with CD7- acute monocytic leukemia, leukemia cells of CD7+ acute monocytic leukemia not only have more primitive features, but also combine a part of characteristics of T-lymphocytes.

　　[Key words] Acute monocytic leukemia; CD7; Bone marrow feature

　　淋巴系分化抗原CD7是一个分子量40 000Ⅰ型跨膜糖蛋白，表达于多能干细胞、原始或幼稚T淋巴细胞或成熟T淋巴细胞，为此一直把CD7作为T淋巴细胞最敏感最特异性的细胞表面标志。但随着流式细胞仪在白血病免疫分型中的运用，许多学者认识到CD7不仅出现于急性T淋巴细胞白血病(T-lineage acute lymphoblastic leukemia，T-ALL)，而且在少数急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia，AML)中也可表达CD7[1-2]。本文回顾分析我院初诊的82例急性单核细胞白血病(AML-M5)患者，其中18例表达CD7，表达率约22.0%。复习18例CD7阳性患者的骨髓片，与CD7阴性的急性单核细胞白血病患者的骨髓片进行比较，旨在观察分析CD7阳性的急性单核细胞白血病的细胞形态及骨髓特征。

　　1 对象和方法

　　1.1 一般资料

　　我院收治的初诊急性单核细胞白血病患者82例，男51例，女31例，年龄5~82岁，中位年龄48岁。根据患者骨髓细胞形态学、细胞化学染色及免疫分型确诊。

　　1.2 免疫分型

　　采用化疗前患者骨髓液，枸橼酸钠抗凝，按三色直接免疫荧光标记进行染色，所用单克隆抗体包括FITC/PE标记的CD5/CD7，CD10/CD19，CD11b/HLA-DR，CD33/CD34，CD13/CD117，CD2/CD3，MPO，CD45为Percp标记，单抗(美国BD公司)。用FACSCalibur流式细胞仪和Cell Quest软件获取分析20 000个细胞，通过CD45/SSC设门识别幼稚细胞。以FITC、PE荧光素标记的无关同型Ig亚型(BD公司)作为阴性对照。

　　1.3 骨髓细胞形态分析

　　采集初诊患者骨髓穿刺涂片，经瑞氏-姬姆萨混合染色液染色，光学显微镜下进行细胞分类计数。

　　1.4 细胞化学染色

　　应用上海虹桥试剂实验研究所的国际标准化白血病细胞化学染色诊断试剂盒，包括：(1)过氧化物酶(POX);(2)氯乙酸AS-D 萘酚酯酶(CE);(4)α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)。计数100个白血病幼稚细胞，统计呈阳性反应的百分率。

　　1.5 CD7+AML-M5诊断标准

　　根据流式细胞仪免疫表型分析，凡原始细胞既有单核系抗原表达(单核系抗原染色阳性率>20%)，又有CD7抗原表达(CD7 抗原染色阳性率>20%)者为CD7+ AML-M5 。

　　1.6 统计学方法

　　计量资料以■±s表示，组间比较采用t检验，率的比较采用χ2检验，等级资料用Wilcoxon秩和检验。检验水准α=0.05，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结 果

　　2.1 免疫表型特征比较

　　见表1。82例急性单核细胞白血病中CD7阳性18例，约占22.0%，CD7阴性64例。

　　2.2 外周血象和骨髓比较

　　见表2。

　　2.3 骨髓增生程度比较

　　CD7+AML-M5患者和CD7-AML-M5患者骨髓增生程度差异有统计学意义见表3。

　　2.4 细胞化学染色比较

　　CD7+与CD7-组相比，POX染色差异具有统计学意义，其余染色未见明显差异。见表4。

　　3 讨 论

　　CD7作为T/NK细胞相关抗原，近来被发现异常表达在少数AML的白血病细胞上，其发生频率从12%~38%不等[3-4]。本组观察发现CD7在AML-M5中的表达率为22.0%，与文献报道相符。CD7+表达与AML的FAB亚型有一定相关性，研究表明[5]在M0至M6各亚型中，CD7的表达频率依次为M1、M5、M2、M4、M6。

　　我们发现CD7+AML-M5与CD7-AML-M5相比，虽然外周血和骨髓中原始细胞比例无明显差异，但是骨髓增生程度总体略低于CD7-的M5，骨髓巨核细胞的数量也偏少。18例中有2例为低增生性白血病，骨髓增生减低，另外有2例骨髓红系呈病态造血改变，推测可能由骨髓增生异常综合征转变而来。CD7+AML-M5骨髓中原始、幼稚单核细胞形态比CD7-AML-M5的胞体小，核染色质较紧密，胞浆少，颗粒减少，形态更原始，不典型原始细胞易见，且POX染色阳性率偏低，通常被诊断为M5a。另外， Del Poeta等[5]报道CD7+AML-M5患者在免疫表型上大多同时表达HLA-DR和CD34抗原，表明白血病细胞较为原始。

　　在白血病的形态学诊断中，M5被误诊为ALL的情况屡见不鲜。本组病例中就有1例CD7+的M5，形态学诊断为急性淋巴细胞白血病。此病例同时表达CD7，CD34，CD33，HLA-DR，CD14;组化染色：POX染色阴性、NBE染色阴性;细胞形态：胞体小、胞核紧密、胞浆少、原始细胞融合了淋巴细胞白血病细胞核折叠和胞浆少的特点。林慧君等[6]报道CD7+AML-M5具有与CD7-AML-M5不同的临床特点，CD7+AML-M5外周血白细胞数、肝脾肿大发生率均高于CD7-AML-M5，且发病年龄轻，CR率低。Kita 等[7]曾对7 例采用AML标准化疗方案无效的CD7+AML-M5患者改用ALL方案治疗，结果5例意外获得完全缓解， 提示对采用AML方案失败可试用ALL方案治疗。

　　综上所述，CD7+AML-M5在细胞形态、细胞组化染色、治疗效果上与一般的AML-M5存在一定差异，所以在初诊时形态学一定要结合免疫分型，以提高诊断的准确性，指导临床治疗及预后判断。

　　【参考文献】

　　[1] Saxena A, Sheridan DP, Card RT, et al. Biologic and clinical significance of CD7 expression in acute myeloid leukemia[J]. Am J Hematol, 1998, 58(4):278-284.

　　[2] Cruse JM, Lewis RE, Pierce S, et al. Aberrant expression of CD7, CD56, and CD79a antigens in acute myeloid leukemias[J]. Exp Mol Pathol, 2005, 79(1):39-41.

　　[3] Chang H, Yeung J, Brandwein J, et al. CD7 expression predicts poor disease free survival and post-remission survival in patients with acute myeloid leukemia and normal karyotype[J]. Leuk Res, 2007, 31(2):157-162.

　　[4] Venditti A, Del Poeta G, Buccisano F, et al. Prognostic relevance of the expression of Tdt and CD7 in 335 cases of acute myeloid leukemia[J]. Leukemia, 1998, 12(7):1056-1063.

　　[5] Del Poeta G, Stasi R, Venditti A, et al. CD7 expression in acute myeloid leukemia[J]. Blood, 1993, 82(9):2929-2930.

　　[6] 林慧君, 吴建国, 吴茅, 等. CD7阳性急性髓细胞白血病的免疫表型及临床特点分析[J]. 中国实验诊断学, 2006, 10(10):1211-1212.

　　[7] Kita K, Miwa H, Nakase K, et al. Clinical importance of CD7 expression in acute myelocytic leukemia. The Japan Cooperative Group of Leukemia/Lymphoma[J].　Blood, 1993, 81(9):2399-2405.