乙肝病毒DNA和乙肝两对半之间关系的探讨

　　【摘要】 目的研究HBV血清学标志物(两对半)和HBVDNA两者之间的相关性，为确定乙肝检测项目提供科学依据。方法采用酶联免疫吸附试验法检测健康体检者HBV血清学标志物，核酸扩增荧光定量检测法检测HBVDNA，并采用SPSS13.0软件进行统计分析。结果476例HBsAg阳性血清中，HBVDNA阳性321例，阳性率67.44%;乙肝大三阳HBVDNA阳性率92.17%，小三阳HBVDNA阳性率为61.00%，两者差异有统计学意义(P<0.01);HBeAg阳性标本中HBVDNA阳性率为92.17%，HbeAg阳性标本中HBVDNA阳性率为67.44%，两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论HBV血清学标志物和HBVDNA二者之间互有联系但又有所不同，不能只以HbeAg的检测结果作为判断HBV传染性和复制的指标，而应选择检测HBVDNA作为补充。

　　【关键词】 乙肝两对半,乙肝病毒DNA,阳性率

　　Abstract:ObjectiveTo study the relationship between HBVDNA and two pairs of semihepatitis B to provide scientific basis for hepatitis B testing projects. Methods Serological markers of people in checkup were tested by enzymeliked immunosorbent assay(ELISA),HBVDNA was tested by nucleic acid amplification(PCR)fluorescence detection,statistical analysis was made by software SPSS13.0. ResultsIn 467 patients who showed HBsAg positive，321 showed HBVDNA positive,accounting for 67.44%,patients with three big positive of HBV accounted for 92.17%,patients with three small positive of HBV accounted for 61.00%,the difference had statistical significance(P<0.01). ConclusionSerological markers and HBVDNA were related and different each other,HbeAg testing results couldn′t be used as indicators of replication and infection,and HBVDNA should be used as supplements.

　　Key words:two pairs of semihepatitis B;HBVDNA;positive rate

　　据估计，全世界现有乙肝病毒携带者3.6亿，其中我国约有1.3亿。乙型肝炎的流行不仅影响整个民族的健康素质，也给社会带来沉重的经济负担，已成为我国目前最为突出的公共卫生问题之一。目前诊断乙型肝炎最常用的指标是检测乙肝病毒(HBV)血清学标志物(即两对半)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测HBV血清学标志物只能反映人体对HBV的免疫反应状态，不能直接反映HBV在患者体内的复制情况，也不能作为判断患者是否具有传染性的直接证据[1]。而HBVDNA含量是判断病毒复制活跃和具有传染性的直接和可靠的依据，定量检测HBVDNA是衡量乙肝传染性的最精确的指标，是确定HBV感染不同复制状态的有效检测手段[2]。为了进一步研究HBV血清学标志物和HBVDNA两者之间的相关性，我们对2005至2008年来吉林省吉林中西医结合医院做健康检查的3 415名正常健康者进行HBV血清学标志物和HBVDNA检测，现将检测结果分析如下。

　　1基本情况

　　1.1标本来源

　　2005至2008年吉林省吉林中西医结合医院3 415名健康体检者血清中HBV血清学标志物阳性512份。

　　1.2检测方法

　　采集静脉血5 mL,分离血清，备测。乙肝两对半采用ELISA检测，检测试剂均由山东3V公司提供。HBVDNA采用核酸扩增(PCR)荧光定量检测法检测，试剂盒由广州达安生物基因有限公司提供。试剂均在有效期内使用，检验方法及结果判定严格按照说明书进行。

　　1.3数据统计分析

　　用SPSS13.0软件对数据进行χ2检验等分析。

　　1.4结果表达

　　为表述方便，设定血清学标志物(HBVM)检测项目等1~5项的排列顺序为：①HBsAg;②抗HBs;③HBeAg;④抗HBe;⑤抗HBc，并以出现阳性项目的序号为该模式的代码。例如某人血清学标志物检测结果为HBsAg阳性，抗HBs阴性，HBeAg阴性，抗HBe阳性，抗HBc阳性，则该模式代码为“1，4，5”。

　　2结果

　　2.1HBVM阳性模式与HBVDNA的关系

　　HBV血清学标志物阳性的各模式中，均有不同程度的病毒DNA复制。476例HbsAg阳性血清中，HBVDNA阳性321例，阳性率67.44%。1，3，5模式(大三阳)和1，3模式中HBVDNA阳性率较高，分别达92.17%和85.71%。1，4，5模式(小三阳)中HBVDNA阳性率为61.00%。乙肝大三阳HBVDNA阳性率明显高于小三阳，差异有统计学意义(χ2=37.416，P<0.01)。各模式中HBVDNA的检测结果见表1。表 1不同HBVM阳性模式中HBVDNA检测结果

　　2.2HBeAg与HBVDNA的关系

　　在122例HBeAg阳性标本中，HBVDNA阳性112例，占91.80%。在354例HBeAg阴性标本中，HBVDNA阳性209例，占59.04%。二者差异有统计学意义(χ2=41.153，P<0.01),见表2。表 2HBeAg和HBVDNA检测结果的关系

　　3讨论

　　本研究中1，3，5模式(大三阳)和1，3模式中HBVDNA阳性率较高，分别达92.17%和85.71%，这与文献报道的HBeAg阳性者中HBVDNA阳性率可高达90%~100%的结论基本一致[23]。HBeAg与HBVDNA关系密切，通常HBeAg阳性者病毒复制活跃，传染性强。从本研究的检测结果也可以看出，HBVDNA检测的阳性率与HBeAg阳性有很好的一致性，从基因定量水平上证实了HBeAg阳性是反映病毒复制的良好指标。但在HBeAg阳性者中仍有部分HBVDNA为阴性，这可能与HBVDNA的消失比HBeAg的消失早或病毒发生变异有关[4]。

　　另外，本研究在354例HBeAg阴性标本中出现HBVDNA阳性209例，表明HBeAg消失或抗HBe或抗HBc出现，并不能代表病毒水平的降低或病情恢复。在HBeAg阴性者中检出HBVDNA，这可能与HBV发生前C区基因突变或机体发生特异性的免疫耐受有关[5]。如果仅以HBeAg的检测结果作为判断HBV感染、传染性以及HBV是否在体内复制有一定的局限性，因此，应选择检测HBVDNA作为HBVM的补充。

　　乙肝两对半早已是基层医疗机构判断人群受HBV感染及传染性大小的指标之一，但是它不能充分反映HBV复制的状况，只提供了HBV感染的间接依据，而HBVDNA的检测，解决了免疫学检测的“窗口期”问题，是真实判断乙肝患者是否具有传染性的直接证据。因此建议对HBsAg阳性者用荧光PCR方法对乙肝病毒携带者进一步作HBVDNA检测，以判定传染性高低及能否从事相关工作，从而保护广大群众的身体健康。

　　【参考文献】

　　[1]程钢，何蕴韶，周新宇.荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒[J].中华医学检验杂志，1999，22(3)：135.

　　[2]朱子梨，古丽巴哈尔，刘建军，等.乙肝HBVDNA荧光定量检测与血清标志物结果相关性分析[J].中国热带医学，2006，6(7)：11381139.

　　[3]钱宇，潘钰卿，高晴.荧光定量PCR法检测乙肝病毒的临床意义[J].上海第二医科大学学报，2001，21(4)：372373.

　　[4]郭彩娇，杨红玲，陈小娟.乙肝血清学标志物与其HBVDNA含量的对比分析[J].中国妇幼保健，2005，20(7)：853854.

　　[5]王小飞，刘华瑞，王锦蓉，等.乙型肝炎和肝癌患者乙型肝炎病毒前C区1896位点突变的研究[J].中华传染病杂志，1996，14(1)：1114.