水资源微生物分布状况的初步研究

　　【摘要】 目的：了解生活用水及环境水资源中微生物状况，并对生活用水与环境水资源的卫生状况提出建议。方法：应用平板菌落计数法和ATB生化鉴定法。结果：饮用水中，隔夜白开水、饮水机冷热水中均检测出过量细菌，且均检测出耐热大肠菌群，均不符合卫生标准。结论：个别饮用水样本中细菌数量较多，需加强消毒管理，湖水细菌情况较复杂，外出游玩时需注意个人用手卫生，其他生活用水基本符合卫生标准。

　　【关键词】 水;大肠杆菌;细菌总数

　　中图分类号　R123.1 　文献标识码　A 　文章编号　1008-2344(2010)03-0187-02

　　The Preliminary Study about Microbial Distribution of Water Resources　　YAN Zhi-qun1，FANG Fang2，LIU Xin2，CHEN Dong-mei2　(1.Department of Medical Laboratory Grade 2006，Shenyang 110034，China;2. Department of Pathogenic Biology，Shenyang Medical College)

　　Abstract　Objective：To study living microorganisms in water from environmental water resources and living water，then to give recommend of the water health.Methods：Plate colony count and ATB biochemical identification were used.Results：Among drinking water samples，there were large number of bacteria in the overnight drinking water，both hot and cold water from water dispenser. All of them were detected with thermotolerant coliforms and did meet health standards. The total bacteria number in samples collected from the normal temperature faucet of drinking water machine was far above its standard level and thermotoletant coliform bacteria was found in some of those samples.Conclusion：Large number of bacteria in several drinking water samples that need to be strengthened sterilization management. The bacteria situation in lake water is more complicated，so persons should pay attention to personal hygiene when going out to play. Other living water samples are basically meet the health standards.

　　Key words　water;Coli; total bacteria

　　水是我们赖以生存的自然资源，在人民生活水平不断提高的今天，人们对身边环境中水的卫生条件的要求也在逐步提高。本实验采用了平板菌落计数法[1]、ATB生化鉴定法[2]，对生活中经常接触的水中微生物进行研究，探讨水资源的卫生条件。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料 取16种不同水样：洗菜水，某医院过滤饮水机，湖水1，湖水2，隔夜白开水，饮水机冷水，饮水机热水，卫生间自来水，家庭卫生间马桶水箱水，家庭卫生间马桶水，某医院肠道门诊卫生间自来水，某医院检验科污水专用自来水，某医院去离子水，宏宝来矿泉水，卫生间下水，卫生间污水池水。

　　1.2 主要仪器 高压蒸汽灭菌器(日本Hirayama HVE-50)，SHH-3 生化培养箱(上海申安实验仪器厂)，迅数(Shineso)自动菌落分析仪，BIOMERIEUX(生物梅里埃)ATB生化鉴定仪，Olympus显微镜。

　　1.3 实验方法 根据2007年7月1日起实行的《国家生活饮用水卫生标准》GB 5749-2006，进行微生物学检查：总大肠菌群(MPN/100 ml或CFU/100 ml)不得检出，耐热大肠菌群(MPN/100 ml或CFU/100 ml)不得检出，大肠埃希氏菌(MPN/100 ml或CFU/100 ml)不得检出，菌落总数(CFU/ml)≤100。

　　1.3.1 菌落总数(CFU/ml，CFU表示菌落形成单位)检测 用灭菌吸管吸取l ml水样，注入灭菌培养皿中。每个样本做四个平皿。分别倾注约15 ml己溶化并冷却到45 ℃左右的EMB培养基和普通培养基(各2个)，并立即在桌上作平面旋摇，使水样与培养基充分混匀。培养基凝固后，倒置于37 ℃和44 ℃温箱中，培养24 h，进行菌落计数。通过菌落计数仪计数≥0.5 mm的菌落，记录每个水样的菌落平均值。

　　1.3.2 革兰染色 对可疑菌落进行革兰染色，观察并记录细菌形态。

　　··沈 阳 医 学 院 学 报第12卷

　　第2期闫智群等.水资源微生物分布状况的初步研究··

　　1.3.3 ATB生化鉴定 按说明书进行操作。

　　2 结果

　　各类型标本中菌落总数(CFU/ml)见表1。

　　表1 各类型样本中菌落总数(CFU/ml)

　　样本名称 37 ℃下基础培养基 37 ℃下EMB培养基 44 ℃下基础培养基 44 ℃下EMB培养基

　　洗菜水 6.96×104 2.68×105 8.34×104 4.14×104

　　隔夜白开水 1.75×104* 5.33×104* 7×103 9.3×104*

　　饮水机水 25±22* 0～10* 34±26 1.0×103±4.8×102*

　　自来水 — 3.4×102±2.2×102 — 1.9×102±1.6×102

　　卫生间水 1.1×104±2.7×103 5.1×103±1.1×103 8.1×102±4.5×102 0～8

　　湖水 4.8×103±4.5×103 — 4.1×102±2.7×102 0～1.34×104

　　*注：GB：国家标准5749-2006 总大肠菌群(MPN/100 ml或CFU/100 ml)不得检出，耐热大肠菌群(MPN/100 ml或CFU/100 ml)不得检出，大肠埃希氏菌(MPN/100 ml或CFU/100 ml)不得检出，菌落总数(CFU/ml)≤100

　　饮用水中，隔夜白开水、饮水机冷热水中均检测出过量细菌，且均检测出耐热大肠菌群，均不符合卫生标准。

　　ATB生化鉴定结果：湖水中细菌主要是革兰阴性杆菌，以假单胞菌属占优势，革兰阳性菌主要是芽孢杆菌，还有部分球菌。

　　3 讨论

　　水是微生物存在与分布的天然良好环境，水中微生物的含量是评价水质优劣的重要指标。水样在一定条件下培养后通过观察与计算所得l ml水样中所含有菌落的总数，是自来水日常检测的七项指标(色度、浊度、细菌总数、大肠菌群、余氯、铁、锰)之一。作为一个常用的微生物基础指标，细菌总数有很强的指标意义，它能定量地反映水中异样细菌的数量，能非常直观地反映水被细菌污染的程度。若在水样中检测出耐热大肠菌群，则说明水样受粪便污染。

　　本次实验中，饮用水中的隔夜白开水，本次使用的容器是，广口带盖玻璃器皿，细菌数量多，造成该结果的原因可能为，容器敞口暴露在空气中或口腔中细菌进入容器中，因其在日常生活中使用频繁，疾病传播几率较高，所以应多注意器皿的清洁。饮水机水，根据数据显示，冷热两种水样耐热大肠杆菌数量均明显超标，可能的原因为，饮水机不间断加热，为耐热细菌提供了适宜生长的温度，饮水机作为日常生活中最常用饮水工具，应注意定期清洗消毒，确保饮用水卫生安全。宏宝来矿泉水，无细菌生长，符合饮用标准。过滤饮水机水，有少量细菌生长，符合GB 5749-2006标准。

　　医院用水中肠道门诊卫生间自来水，37 ℃下培养有少量大肠杆菌生长，疑为水龙头接触空气中细菌造成，肠道疾病的传播主要通过粪口途径，患者及家属在医院活动过程中极易受到感染，所以应定期消毒灭菌。检验科污水专用自来水，以少量杆菌为主，极少部分耐热大肠菌群，医务人员接触较频繁，应定期消毒灭菌，防止工作中的细菌感染。去离子水，无细菌生长。

　　生活用水样本中的洗菜水，为十六个样本中细菌数最多，多数为土壤中细菌。在日常生活中，对新鲜蔬菜的清洗的同时应加热除菌后再食用。卫生间自来水，家庭卫生间马桶水箱水，卫生间马桶水，水中均有少量耐热菌生长。卫生间下水，以大肠杆菌为主，细菌数量较多，应注意消毒灭菌，预防肠道疾病传播。卫生间污水池水，细菌数量较多，应注意在清洗洁厕用具时消毒灭菌。湖水，细菌数量较多，细菌主要是革兰阴性杆菌，以假单胞菌属占优势，革兰阳性菌主要是芽孢杆菌，还有部分球菌。湖水中的微生态环境复杂，受影响因素多，在日常生活中，在湖边游玩应特别注意手的清洁。

　　【参考文献】

　　[1]蒋增辉，王幸艳.介绍几种新的水中细菌总数检测方法[J]，城市给排水，2005,19(2)：15-16.

　　[2]洪晓鹏.ATB细菌鉴定及药敏分析仪常见问题的对策及使用技巧[J]，华北煤炭医学院报，2003,5(1)：44.