对大鼠高脂血症模型分型的探讨

　　【摘要】 　　目的：利用脂肪乳剂灌胃法和高脂饲料喂养法建立大鼠高脂血症动物模型，结合临床高脂血症分型的依据对其血脂水平进行对比研究，为更合理的使用高脂血症动物模型提供依据。 方法：采用无特定病原体Wistar大鼠，雄性，180～220　g，30只，按体重随机分为3组，分别给予普通饲料、每100克体重2ml脂肪乳剂灌胃和高脂饲料，分别在第0天和第14天检测血清总胆固醇(TC)，甘油三酯(TG)，高密度脂蛋白胆固醇(HDLc)，低密度脂蛋白胆固醇(LDLc)。结果：脂肪乳灌胃组的血清TC、TG、LDLc较对照组升高，有统计学意义;高脂饲料组的血清TC、LDLc较对照组升高，有统计学意义;TG较对照组有所下降，有统计学意义。 结论：2种方法都可建立大鼠高脂血症模型，脂肪乳灌胃法建立的动物模型适合应用于高胆固醇血症、混合型高脂血症、高甘油三酯和低高密度脂蛋白血症的研究;高脂饲料喂养法建立的动物模型适合应用于单纯性高胆固醇血症的研究，不适合用于混合型高脂血症、高甘油三酯和低高密度脂蛋白血症的研究。

　　【关键词】 大鼠高脂血症模型; 脂肪乳剂灌胃; 高脂饲料

　　An originally typing animal models of hyperlipidemia

　　JI Fengcai, YAO Gang, LI Linlin, et al

　　(The Animal Center of Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China)

　　Abstract: Objective: Establish hyperlipidemia animal models with methods of gastric perfusion intralipid and high fat diet. The lipid levels were compared according to the clinical type of hyperlipidemia and provide the data on how to choose suitable animal model of hyperlipidemia. Methods: Thirty male wistar rats with specific pathogenfree were divided into three groups randomly. One group is general feeding, another two are feeding by gastric perfusion intralipid and high fat diet 2 ml per 100 g weight. The serum levels of TC, TG, HDLc and LDLc were tested at the first day and fourteenth. Results: There is a statistical significance between groups, for TC, TG and LDLc levels, the gastric perfusion intralipid group are higher than control group. The TC, LDLc levels of high fat diet group are higher than control group. TG level of this group is lower than control group. Conclusion: The hyperlipidemia model on rats could be established by these two ways. Gastric perfusion intralipid model is suitable for research of hypercholesteremia, mixed hyperlipoidemia, hypertriglyceridemia, hypolipoproteinemia with highdensity lipoprotein. High fat diet models is suitable for research of simple hypercholesteremia, not suitable for mixed hyperlipoidemia, hypertriglyceridemia, hypolipoproteinemia with highdensity lipoprotein.

　　Key words: hyperlipidemia models in rats; gastric perfusion intralipid; high fat diet

　　动脉粥样硬化是导致心脑血管疾病最主要的病理基础,而血脂紊乱导致的高脂血症是动脉粥样硬化重要的危险因素，通过建立高脂血症的动物模型可以寻找高脂血症的发病原因,探讨高脂血症的预防和治疗。大鼠是目前国内外研究脂质代谢、高脂血症过程中使用最广泛的一种模型动物, 它具有价格相对较低、生产周期较短、易于饲养管理、抵抗力强、实验取材可满足大量指标的检测等特点，被广泛用于高脂血症研究的模型动物[1]。目前，大鼠高脂血症动物模型已被大量应用于临床高脂血症的研究中，那么不同配方、不同方法建立的大鼠高脂血症动物模型是否存在差异?同一种模型是否适用于所有类型高脂血症的研究呢?本实验拟在相同实验周期内，通过脂肪乳剂灌胃法、高脂饲料喂养法分别建立大鼠高血脂模型，结合临床高脂血症分型的依据对其血脂水平进行对比研究，为更合理的使用大鼠高脂血症动物模型提供依据。

　　1材料与方法

　　1.1实验动物采用无特定病原体Wistar大鼠，雄性，180～220 g，30只，由新疆医科大学实验动物中心提供，合格证号：XK(新)20030001。

　　1.2实验试剂(1)胆固醇：上海蓝季生物科技有限公司，批号040320。(2)猪胆酸钠：北京奥博星生物技术有限责任公司，批号20061115。(3)丙硫氧嘧啶片：上海复星朝晖药业有限公司，批号 051102。(4)猪油：自制。(5)吐温80(化学醇)：天津市福晨化学试剂厂，批号20060103。(6)丙二醇(分析纯)：天津市天达净化材料精细化工厂，批号061206。

　　1.3实验仪器离心机：xyj2型台式高速离心机。生化分析仪：罗氏800型。

　　1.4饲料配制脂肪乳剂的配制：10%胆固醇、25%猪油、3%胆酸钠、10%吐温80、20%丙二醇，加蒸馏水至100 ml，搅拌均匀，冰箱冷藏备用;高脂饲料的配制[2]：2%胆固醇、10%猪油、0.2%丙基硫氧嘧啶，87.8%基础饲料(由新疆医科大学实验动物中心提供)压制而成。

　　1.5动物分组将30只大鼠按体重随机分为3组，即正常对照组、脂肪乳灌胃组、高脂饲料组。

　　1.6实验方法动物在适应性喂养1周之后，禁食(不禁水) 12 h后眼眶静脉丛采血 3 000 r/min离心5 min，分离血清后用生化分析仪检测血脂四项，即总胆固醇(TC)，甘油三酯(TG)，高密度脂蛋白胆固醇(HDLc)，低密度脂蛋白胆固醇(LDLc)。正常对照组自由采食基础饲料;脂肪乳灌胃组每日按照2 ml/100克体重灌胃脂肪乳剂，同时自由采食基础饲料;高脂饲料组自由采食高脂饲料。各组大鼠自由饮用纯净水。第14天禁食(不禁水)12 h 后眼眶静脉丛采血，3 000 r/min离心5 min，分离血清后用生化分析仪检测血脂四项。

　　1.7统计学方法使用SPSS 11.0统计软件，计量资料数据采用±s检验。对照组及各实验组之间的比较采用多个样本资料的单因素方差分析，检验水准α=0.05。

　　2结果

　　造模前三组动物血清TC、TG、 HDLc、LDLc之间差异无统计学意义(P>0.05)。造模后脂肪乳剂灌胃组血清TC、TG、 LDLc较对照组升高，HDLc较对照组降低，有统计学意义(P<0.05)，高脂饲料组的血清TC、LDLc较对照组升高，TG较对照组降低，有统计学意义(P<0.05),高脂饲料组与脂肪乳剂灌胃组比较，血清TG、 HDLc变化有统计学意义(P<0.05),两种方法均造摸成功(表1)。

　　表1造模后血清血脂指标比较(略)

　　注：与对照组比较, *P<0.05); 与脂肪乳剂灌胃组比较, △P<0.05

　　3讨论

　　本实验中脂肪乳剂灌胃组与高脂饲料组相比，血清TC 、LDLc升高水平无统计学意义(P>0.05)，高脂饲料组血清TG降低水平有统计学意义(P>0.05)，其原因可能与饲料配方中猪油含量低、不含胆酸钠及喂养时间短有关。说明不同配方，不同方法，不同造模周期建立的高脂血症动物模型的血脂水平是不相同的。目前，临床上根据血脂水平可将高脂血症分为以下四类：(1)高胆固醇血症：血清TC水平增高; (2)混合型高脂血症:血清TC与TG水平均增高;(3)高甘油三酯血症：血清TG水平增高;(4)低高密度脂蛋白血症：血清HDLC水平减低[3]。通过本实验研究，可以看出两种方法的造模时间都是14 d，但由于饲料配方不同，导致动物模型的血脂水平变化不同，造模的效果也不同。脂肪乳剂灌胃组的血清TC 、TG、 LDLc较对照组升高，高脂饲料组的血清TC 、LDLc较对照组升高，TG较对照组降低，表明脂肪乳剂灌胃法建立的高脂血症动物模型适合应用于高胆固醇血症、混合型高脂血症、高甘油三酯和低高密度脂蛋白血症的研究中;高脂饲料喂养法建立的动物模型适合应用于单纯性高胆固醇血症的研究中，不适合应用于混合型高脂血症、高甘油三酯和低高密度脂蛋白血症的研究中。因此，大鼠高脂血症动物模型可以与临床高脂血症四种类型分别对应。我们不能盲目使用高脂血症动物模型，在建立高脂血症动物模型时，必须根据实验目的有针对性的选择不同配方、不同方法和不同造摸周期建立相应类型的高脂血症动物模型。

　　【参考文献】

　　[1]刘雪梅,吴符火.几类高脂血症动物模型的比较[J].中西医结合学报，2004，2(2)：132134.

　　[2]李大伟, 张玲, 夏作理.建立高脂血症模型的动物选择与常用造模方法分析及改进[J].中国临床康复 2006，10(48)：145147.

　　[3]诸骏仁，陶寿淇.高血脂症的分类与防治[J].岭南心血管病杂志，2005，(4)：296.