海罂粟提取物镇咳祛痰平喘作用的研究

　　【摘要】 目的探讨海罂粟提取物的镇咳祛痰平喘作用。方法昆明种健康小鼠70只随机分为5组， 对照组、肺力咳组及海罂粟高、中、低浓度(0.2、0.1和0.05 g/ml)组，分别采用氨水引咳法、酚红排泄法测定不同浓度的海罂粟提取物的镇咳、祛痰作用。另选择豚鼠24只，各取2个气管螺旋条标本，随机分为6组，即对照组、盐酸异丙肾上腺组及海罂粟高、中、低浓度(0.2、0.1和0.05 g/ml)、极低浓度(0.025 g/ml)组，采用气管螺旋条法测定不同浓度的海罂粟提取物的平喘作用。结果不同浓度的海罂粟提取物均具有镇咳作用，能有效减少咳嗽次数，咳嗽次数均低于对照组和肺力咳组，其差异具有统计学意义(P<0.05)。海罂粟高中低浓度组咳嗽潜伏期均长于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。海罂粟高浓度组气管内酚红排泄量低于对照组(P<0.05)。不同浓度的海罂粟提取物提取物对于气管螺旋条的解痉率均大于对照组(P<0.05)。结论海罂粟提取物具有镇咳、平喘作用，但祛痰作用不明显。

　　【关键词】 海罂粟; 镇咳; 祛痰; 平喘

　　Study on the antitussive, eliminating phlegm and antiasthmatic

　　effects of extract from Glaucium

　　ZHANG Rong, LONG Mei, Nadila, et al

　　(College of Preclinical Medicine, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011， China )

　　Abstract: ObjectiveStudy on the antitussive, eliminating phlegm and antiasthmatic effects of Glaucium extraction. Method70 mice were divided randomly into 5 groups, they were control group, feilike group, high dose glaucium group, middle dose group and low dose group. To generating cough by the method of ammoniainduction, to use the phenolsulfonphthalein and trachea chain excretion test to determine the antitussive, eliminating phlegm and antiasthmatic effects of different consistence from Glaucium extracts. Another 20 guinea pigs were divided into 6 groups, they were control group, isoprenalinehydrochloride group, high dose glaucium group, middle dose group and low dose group. Then to determine the antiasthmatic effects by the method of trachea spiral strip. ResultAll of different dose of glaucium extracts have the antitussive function, there are significant differences in the experimental, Feilike and control groups (P<0.05). Different dose of glaucium extracts all have the function of decreasing the coughing times. They had longer delitescence comparing to that ofthe control group. There are significant difference in experimental group, standard and blank (P<0.05). Different dose of glaucium extracts have higher spasmolysis rate compared to that of control group. ConclusionEextracts from Glaucium have antitussive and antiasthmatic effects，no eliminating phlegm effect.

　　Key words: glaucium; antitussive; eliminating phlegm; antiasthmatic

　　咳、痰、喘是呼吸道疾病的主要临床症状。咳嗽是一种保护性反射，可促进痰液和异物的排出，但剧烈而频繁的咳嗽也可引起其它并发症。目前临床常采用镇咳、祛痰、平喘的方法来进行综合治疗。

　　海罂粟属罂粟科植物，我国有3种海罂粟属(Glaucium)，新疆地区主要有新疆海罂粟(Glaucium squamigerum Kar)和天山海罂粟(Glaucium elegans Fisch)。国内外学者对该科植物的化学成分研究主要集中在其所含有的异喹啉类生物碱。目前发现该科植物药理作用明显,尤其对神经系统作用显著，具有镇痛、镇静和抑制呼吸等作用[1]。本文对海罂粟的提取物的镇咳祛痰平喘作用进行动物实验研究，进一步明确海罂粟的药理作用，为最大限度地开发其药用价值提供可靠的实验依据。

　　1材料和方法

　　1.1药材、试剂与仪器

　　1.1.1药材新疆海罂粟(Glaucium squamigerum Kar)，采于乌鲁木齐硫磺沟。

　　1.1.2试剂海罂粟高、中、低浓度(0.2、0.1、0.05 g/ml)，氨水(25%，氢氧化铵)，生理盐水，肺力咳合剂(贵州健兴药业有限公司)，0.5%酚红溶液，5% NaHCO3溶液， KrebHenseleit溶液，组胺溶液(1×10-6 g/ml),盐酸异丙肾上腺素(上海禾丰制药有限公司, 2 ml∶1 mg)。

　　1.1.3仪器分光光度计(722型)，离心机(TGL16G)，喷雾装置(自制)，灌胃装置，恒温水浴箱(501型)，BL410张力换能器系统(成都泰盟公司提供)，供氧装置，L型尺，手术器械若干。

　　1.2实验动物及分组昆明种健康小鼠70只，雌雄各半，体重18～22 g(新疆医科大学实验动物中心提供)。随机分为5组，即对照组(生理盐水)、肺力咳组及海罂粟高、中、低浓度(0.2、0.1和0.05 g/ml)组，每组14只。健康豚鼠24只，雌雄不限，体重200～400 g(新疆医科大学实验动物中心提供)。随机分为6组，即对照组、盐酸异丙肾上腺素组及海罂粟高、中、低(0.2、0.1和0.05 g/ml)、极低浓度(0.025 g/ml)组，每组4只，每只取2个气管螺旋条样本，即每组8个样本。

　　1.3方法

　　1.3.1镇咳实验[2]对照组按0.2 ml/10 g的灌胃量灌生理盐水，海罂粟各剂量组按海罂粟设计量以0.2 ml/10 g灌胃，肺力咳组按9.01×10-2ml/10 g的量灌以肺力咳合剂。1次/d，连续7 d。末次给药60 min后，将小鼠置于500 ml玻璃钟罩内，通过空气压缩机连接玻璃喷雾头，以400 mmHg恒压将氨水(25 % 氢氧化铵)均匀的喷入钟罩内，喷雾20 s,喷雾终止后，小鼠开始咳嗽后立即取出。观察和记录小鼠的咳嗽潜伏期(由喷雾开始至产生咳嗽的时间)和2 min内咳嗽的次数(表现为小鼠腹肌收缩，同时张大嘴，有时伴有咳嗽声)。

　　1.3.2祛痰实验对照组按0.2 ml/10 g的灌胃量灌生理盐水，海罂粟各剂量组按海罂粟设计量以0.2 ml/10 g灌胃，肺力咳组按9.01×10-2ml/10 g的量灌以肺力咳合剂。1次/d，连续7 d。末次给药前禁食不禁水。末次给药45 min后，按0.5 ml/20 g的量，腹腔注射0.5 % 酚红生理盐水。15 min后脱颈处死，于蛙板上手术分离气管，抽取1.5 ml的 5 % NaHCO3溶液进行浸泡收集洗液，以1 000 r/min离心10 min。取上清液，使用722型分光光度计在波长546 nm处测OD值，再根据回归方程计算出相对应的浓度。

　　1.3.3平喘实验麦氏浴槽中加入KrebHenseleit溶液15 ml，匀速通入氧气，稳定1 h。取宽约3 mm的豚鼠气管螺旋条。将气管螺旋条与肌力换能器、BL410生物机能实验系统相连。待基线稳定，设张力为20 g。每20分钟换15 ml KrebHenseleit溶液。1 h后记录一段正常曲线的平均张力。加入1.5 ml浓度为1×10-6 g/ml组胺溶液后，观察图像变化，3～5 min后曲线趋于稳定后记录其平均张力。分别向6组加入生理盐水、盐酸异丙肾上腺素、海罂粟高、中、低、极低浓度制剂。观察气管螺旋条的松弛情况，稳定后记录平均张力。计算解痉率:解痉率=(组胺时峰值-加入药物时平均值)×100%组胺时峰值

　　1.4统计学处理采用SPSS11.0统计软件包对数据进行分析，所有数据以均数±标准差(±s)表示，方差齐时采用方差分析及两两比较的q检验，当方差不齐时，采用秩和检验，检验水准α=0.05。

　　2结果

　　2.1各组镇咳作用的比较海罂粟高、中、低浓度组分别与对照组、肺力咳组比较，咳嗽次数均明显减少，差异有统计学意义(P<0.05)，其镇咳效果随海罂粟浓度增加而增强，海罂粟中、高浓度组尤为明显，甚至优于肺力咳组。海罂粟各浓度组之间镇咳作用差异无统计学意义。 海罂粟高、中、低浓度组与对照组比较，咳嗽潜伏期均明显延长，差异有统计学意义(P<0.05),并随海罂粟浓度增加呈递增趋势，但与肺力咳组相比，咳嗽潜伏期差异无统计学意义，见表1。表1各组镇咳作用的比较

　　2.2各组祛痰作用的比较海罂粟中、低浓度组与对照组和肺力咳组比较，气管内酚红排泄量差异无统计学意义，仅海罂粟高浓度组分泌量低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。海罂粟各浓度组间差异无统计学意义，见表2。

　　2.3各组平喘作用的比较海罂粟各浓度组解痉率均大于对照组，其解痉程度随浓度的增加而呈升高趋势，差异具有统计学意义(P<0.05)，但各浓度组间解痉率差别无统计学意义。海罂粟各浓度组与异丙肾上腺素组相比，解痉率差异无统计学意义，见表3。表2各组祛痰作用的比较表3各组平喘作用比较

　　3讨论

　　呼吸系统疾病不仅发病率高，且多呈慢性病程。肺功能逐渐损害，最终使患者致残甚至危及生命[3]。如能有效地缓解咳、痰、喘三大临床症状，将大大改善患者生活质量和提高生存率。本实验通过探讨海罂粟镇咳、祛痰、平喘作用，对今后镇咳平喘祛痰药物的开发和利用具有指导意义。

　　咳嗽是一种保护性反射，以清除外界侵入呼吸道的异物和气道内的分泌物，消除呼吸道刺激因子，抵御感染[4]。镇咳药物根据其药理作用可分为中枢性和外周性。外周性镇咳药既有局部麻醉也有粘膜防护的作用，如本实验中所使用的肺力咳即属于外周性镇咳药。在氨水引咳实验中，海罂粟各浓度组与对照组比较，均有减少咳嗽次数、延长咳嗽潜伏期的作用;与肺力咳组比较，海罂粟各浓度组能减少咳嗽次数。说明海罂粟确有镇咳、延长咳嗽潜伏期的作用，其作用效果与药物浓度相关。海罂粟属罂粟科(papaveraceae),几乎均含阿片碱,可能由于海罂粟中所含的阿片碱能够直接作用于延髓的中枢或脑干的呼吸中枢，刺激肺内感受器的μ受体，μ受体兴奋后可减少气道粘液的生成或增加粘液的廓清，从而减轻咳嗽，延长咳嗽潜伏期[5]。

　　咳痰是机体通过支气管粘膜上皮细胞的纤毛运动、支气管平滑肌的收缩及咳嗽气流的冲动，将呼吸道分泌物从口腔排出的协同动作。慢性肺部炎症患者气道的杯状细胞增多，痰液黏稠度增加，改变了纤毛与黏液之间的正常关系，降低了纤毛的黏液输送速率。故通过改善痰液的粘稠度，可使纤毛、黏液的位置趋向正常，有利于纤毛的黏液输送。本研究酚红排泄实验中，并没有发现海罂粟提取物明显的祛痰作用。这与我们所预期的效果有较大出入。这种偏差可能与下列因素有关：(1)挥发油和呋喃类化合物的丢失。挥发油具有挥发性且易溶于无水乙醇。在实验过程当中，曾用无水乙醇溶解固体海罂粟，浓度越高使用的乙醇剂量越大。(2)抑制延脑咳嗽中枢。海罂粟含有阿片碱，能抑制咳嗽反射，也可能使痰不易咳出[6]。

　　支气管哮喘是一种慢性炎症，是气道慢性炎症疾病病变引起的支气管高反应性，在外源性或内源性刺激因素触发下而导致的可逆的气道狭窄所产生的临床综合征[7]。大多数平喘药具有抗炎作用,能缓解支气管阻塞和降低气道的高反应性，能控制、缓解和预防喘息症状。在本次气管螺旋条实验中，海罂粟各浓度组与对照组比较，解痉率差异具有统计学意义，说明其具有平喘作用，平喘效果随海罂粟浓度升高而增强。

　　总之，咳嗽、气喘是临床常见病、多发病，目前常用的镇咳、平喘药以合成药物为主，不良反应较多;而一些具有镇咳、平喘作用的中成药，虽无躯体依赖性，但作用弱、起效慢，临床用药受到一定限制。本实验通过镇咳、祛痰、平喘方面的研究，发现海罂粟具有一定的镇咳、平喘作用，作用效果与浓度相关，且优于临床常用药肺力咳。目前，海罂粟提取物的有效成分有待进一步分析,若同时能证明海罂粟没有其他罂粟类植物的成瘾性，明确各个成分的药理作用，将为新疆海罂粟的开发提供一定的实验依据。

　　【参考文献】

　　[1]蓝蓉，崔箭，覃筱燕，等.民族药野罂粟的化学及应用研究现状与发展前景[J].微量元素与健康研究,2006,23(4):5153.

　　[2]徐叔云,卞如濂,陈修.药理学实验方法[M].第3版.北京:人民卫生出版社,2002:13591370.

　　[3]王吉耀，廖二元，胡品津.内科学[M].北京:人民卫生出版社,2005:1112.

　　[4]刘又宁.呼吸系统疾病治疗学[M].北京:科学出版社,2005:258259.

　　[5]蔡少青,王天志,秦路平.生药学[M].北京：人民卫生出版社，2007:194198.

　　[6]李端,殷明.药理学[M].北京:人民卫生出版社，2006：268269.

　　[7]徐丽华,蒋萌，邹建东，等.野罂粟总生物碱对单纯型慢性支气管炎止咳效应的药物适应症探索试验[J].中国循证医学杂志,2005,5(2):148151.