热休克蛋白27及Bcl2在宫颈鳞癌中的表达及意义

　　【摘要】 目的 探讨热休克蛋白27和Bcl2在宫颈鳞癌中的表达及意义。方法 应用免疫组化方法检测HSP27、Bcl2 在7例正常宫颈组织，18例宫颈上皮内瘤变，60例宫颈鳞癌中的表达。结果 宫颈鳞癌组织中HSP27、Bcl2阳性表达率显著高于正常宫颈组织 (P<0.05);宫颈鳞癌中HSP27的阳性表达与病理分级密切相关(P<0.05);HSP27与Bcl2在宫颈鳞癌中的表达无明显一致性(P>0.05) 。结论 HSP27、Bcl2均在宫颈鳞癌发生和发展中起重要作用;HSP27可能参与了宫颈鳞癌的早期发生。

　　【关键词】 宫颈癌;热休克蛋白27;白血病基因-2

　　Expression and Significance of HSP27 and Bcl2 in CervicalSquamous Cell Carcinoma

　　GUO Yunhong, ZHOU Xiaoyan, WU Xianghui,et al

　　(First Affiliated Hospital，Henan University of Science and Technology,Luoyang 471003,China)

　　Abstract:Objective To explore the expression and significance of HSP27 and Bcl2 in cervical squamous cell carcinoma. Methods Immunohistochemical method for HSP27 and Bcl2 were performed on 60 cases of cervical squamous carcinomas,18 cases of CIN and 10 cases of normal cervical tissues. Results In cervical squamous cell carcinoma, the expressions of HSP27 and Bcl2 were markedly higher than those of normal cervical samples,HSP27 expression was closely correlated with the pathological grade; there were no relations between the expression of Bcl2 and HSP27. Conclusion HSP27 and Bcl2 should play an important role in the genesis and development of cervical squamous cell carcinoma.

　　Key words:cervical carcinoma;heat shock protein27;Bcl2

　　宫颈癌是全球妇女恶性肿瘤仅次于乳腺癌的恶性肿瘤，在发展中国家其发病率居第1位，且呈明显的上升和年轻化趋势。热休克蛋白(heat shock protein，HSP)在许多肿瘤中呈高表达，与肿瘤的发生、增殖、分化，肿瘤免疫以及机体对肿瘤治疗药物耐药性的发生和肿瘤的预后等都有密切关系[1]。本实验通过对热休克蛋白家族中HSP 27及Bcl2的研究，探讨两者在宫颈癌发生、发展中的作用及相互关系。

　　1 材料与方法

　　1.1 组织标本来源 60 例宫颈鳞癌组织为河南科技大学第一附属医院妇科2000～2004年手术切除标本，全部病例手术前均未做放疗、化疗，年龄30～70岁，平均45岁;临床分期根据国际妇产科联盟(FIGO)1994年会议修改临床分期规定，本资料60 例的临床分期为Ⅰ～Ⅲ期，其中23例病理检查证实有不同程度盆腔淋巴结转移;按照1998年版《妇产科病理学》组织学分类标准分为：高分化鳞癌10例，中分化22例，低分化28例;此外，选择CIN18例，正常宫颈组织7例。

　　1.2 方法 所有试剂均购自福建迈新公司，HSP27、Bcl2基因蛋白的检测采用免疫组织化学SP法，石蜡切片脱蜡至水，3%H2O2去除内源性过氧化物酶，0.01 mol/L柠檬酸缓冲液煮沸修复抗原，加入一抗、二抗，孵育反应，DAB染色, 苏木素复染。实验以已知阳性切片做阳性对照，以PBS代替一抗做阴性对照。

　　1.3 结果判定 光镜下细胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性细胞。在高倍镜下取5个热点视野, 计数阳性细胞与肿瘤细胞的百分比：<5% 为(-)，5%～25%(+)，25%～50%(++)，≥50%(+++)。从+～+++都记为阳性。

　　1.4 统计学处理 采用 SPSS14.0统计软件，用卡方检验，评价一致性系数Kappa，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 宫颈鳞癌组织、CIN和正常宫颈组织中HSP27、Bcl2的表达 HSP 27、Bcl2主要在胞浆着色。两者在宫颈鳞癌组织中的表达水平明显高于正常宫颈组织(P<0.05)，Bcl2 在宫颈鳞癌组织中的表达明显高于CIN组织(P<0.01)，而HSP27在宫颈鳞癌组织和CIN间的表达无明显差异 (P>0.05)。见表1。表1 HSP27、Bcl2在不同宫颈组织中的表达

　　2.2 HSP27、Bcl2的蛋白表达水平与临床病理指标的联系 HSP27在高、中、低分化宫颈鳞癌组织中阳性表达率分别为90.0%(9/10)、81.8%(18/22)、50.0%(14/28)，呈下降趋势(P<0.05)，但与淋巴结转移、临床分期之间的关系无统计学意义(P>0.05);Bcl2在高、中、低分化宫颈鳞癌组织中表达呈逐渐上升趋势，但无统计学意义(P>0.05)，Bcl2与各项病理指标之间的关系无统计学意义(P>0.05)。见表2。表2 宫颈鳞癌组织中HSP27、Bcl2表达

　　2.3 HSP 27、Bcl2两者间的关系 60例宫颈癌中Bcl2和HSP 27基因蛋白共同阳性34例，共同阴性3例;表达一致者37例，不一致者23例;HSP 27阴性Bcl2阳性16例，HSP27阳性Bcl2阴性7例。采用评价一致性系数Kappa，Kappa系数=0.015，P=0.901，表明结果一致性不好，两者无明显一致性。

　　3 讨论

　　Bcl2的主要作用是抑制Caspase的激活底物如细胞色素C、凋亡诱导因子(AIF)等从线粒体释放到细胞质, 抑制细胞凋亡。本研究表明，Bcl2在宫颈鳞癌组织中的表达明显高于CIN和正常宫颈组织，在肿瘤组织中发挥抑制细胞凋亡的作用，从而使细胞增殖和凋亡不平衡，延长了细胞的寿命，在肿瘤发生、发展过程中起重要作用[2]。

　　HSP27是热休克蛋白家族中重要一员，其分子量为 27 000。 热休克蛋白广泛存在于原核和真核生物中，不仅在细胞周期调节、DNA损伤的控制、基因产物的代谢等方面发挥重要作用，也与肿瘤的发生、发展，肿瘤免疫以及肿瘤预后都有密切的关系[3，4]。有学者研究证实癌组织中HSP27表达明显高于正常子宫内膜和乳腺组织。我们的研究表明HSP27在宫颈鳞癌的阳性表达率(68.3%)高于正常宫颈组织(14.3%)，差异有显著性(P<0.05)，但在宫颈鳞癌CIN(50.0%)间的阳性表达率差异无显著性(P>0.05)。考虑HSP27参与宫颈鳞癌发生、发展很可能在于促使宫颈组织由CIN向宫颈鳞癌演变这一环节，用Kappa系数检测HSP27、Bcl2两者间的关系，结果一致性不好，说明HSP27可能并没有与Bcl2同步发挥促进肿瘤发生、发展的作用，而是可能参与了宫颈鳞癌的早期发生。

　　有学者研究发现HSP27过表达能够下调分化基因mRNA(G24)在鳞状细胞癌珠A431和正常人角化细胞分化过程中的表达，从而发挥其在细胞分化中的调节作用[5]。已有研究证实，在高分化胃癌、食管癌组织中HSP27表达率显著高于低分化组[6]。本研究发现HSP27在高、中、低分化的宫颈鳞癌组织中表达呈逐渐下降趋势，差异有显著性(P<0.05)，说明HSP27在宫颈鳞癌分化过程中同样发挥调节作用，很可能对肿瘤细胞恶性分化转型具有保护作用。

　　总之，本研究显示HSP27、Bcl2均在宫颈鳞癌的发生和发展中起重要作用，HSP 27可能参与了宫颈鳞癌的早期发生，并对肿瘤细胞恶性分化转型具有保护作用。

　　【参考文献】

　　[1] Wang XP,Qiu FR,Liu GZ,et al.Correlation between clinicopathology and expression of heat shock protein 70 and glucoseregulated protein 94 in human colonic adenocarcinoma[J].World J Gastroenterol, 2005,11(7)：1056-1059.

　　[2] 徐刚,刘占举,崔静,等. P53和bcl 2在胰腺癌组织中的表达及意义[J].河南科技大学学报(医学版)，2007,3(25):5-7.

　　[3] Lebret T,Watson RW,Molinie V.Heat shock proteins HSP27, HSP60, HSP70 and HSP90: expression in bladder carcinoma[J].Cancer,2003,98(5):970-977.