制首乌对亚急性衰老大鼠血清乳酸脱氢酶活性及胸腺、脾脏质量的影响

　　【摘要】 [目的]探讨不同蒸制时间制首乌对亚急性衰老大鼠抗衰老作用，并探讨最佳蒸制时间[方法]取Wistar系大鼠，随机分为正常组、模型组(每日给予D半乳糖50mg/kg)、人参皂苷组(每日给予人参皂苷100mg/kg,D半乳糖50mg/kg)、生首乌组(每日给予生首乌4.5g/kg, D半乳糖50mg/kg)、黑豆汁制首乌0，2，4，6，8，10h(蒸制时间)组(每日给予制首乌4.5g/kg,D半乳糖50mg/kg)，均连续给予42d.末次给药后采血，测定血清乳酸脱氢酶活性，剖取胸腺及脾脏，称取胸腺及脾脏质量[结果]不同蒸制时间黑豆汁制首乌组大鼠血清乳酸脱氢酶活性均显著低于模型组，胸腺及脾脏质量均显著高于模型组[结论]黑豆汁制首乌可延缓D半乳糖所致大鼠的衰老.

　　【关键词】 抗衰老药(中药 何首乌 大鼠

　　Effects of the Polygonum miltiflorum Thunb. for LDH activities, weights of thymus and spleen on in subacute senile rats

　　LI Guiling1, HUANG Mingji2， YIN Dawei1, QU Xiangzhi1, CHEN Zhengai1*

　　(1.Department of Pharmacology, College of Basic Medicine;2. Department of Pharmacology, College of Nursing：Yanbian University, Yanji 133000, Jilin, China)

　　ABSTRACT:OBJECTIVETo investigate the antisenile effects of the Polygonum miltiflorum Thunb.(PMT) of the different steamed times in subacute senile ratsMETHODSWistar rats were randomly divided into ten groups with a half of female or male:normal group, model group (Dgalactose, 50mg/kg per day), ginsenoside group (100mg/kg,　Dgalactose, 50mg/kg per day), PMT by steamed without adjuvant group and 0, 2, 4, 6, 8, 10h of PMT by steamed with bean groups for 42 days and LDH activities of serum were assayed and weights of thymus and spleen was measured, respectivelyRESULTSAfter injection of Dgalactose, the activities of LDH was decreased by the PMT of the different steamed times with bean groups. The weights of thymus and spleen were both increased in PMT by steamed with bean groupsCONCLUSIONPMT of the different steamed times has a obvious antisenile effect. However, 10h of PMT by steamed with bean was the best steamed time.

　　Key words:antiaging drugs(TCD);polygonium multiflorum;rats

　　何首乌，又称首乌、赤首乌及乌肝石等，是蓼科植物何首乌(Polygonum miltiflorum Thunb.)的干燥块根，根据炮制方法不同可分为生首乌和制首乌.将何首乌原药洗净切片或切成块状，晒干的为生首乌，其味苦、涩，性平;将生品与黑豆汁拌蒸或经其他炮制法炮制的称为制首乌，其味苦、甘、涩，性温.何首乌主要化学成分为蒽醌类、磷脂类和二苯乙烯苷类等[1,2]，具有抗衰老、降血脂、抗动脉粥样硬化、增强免疫功能、消炎及镇痛等作用.本实验观察了不同蒸制时间的黑豆汁制首乌对亚急性衰老大鼠乳酸脱氢酶活性及对免疫器官质量的影响，探讨了制首乌的抗衰老作用.

　　1 材料

　　1.1 药品与试剂 实验所用何首乌制品(干品)由吉林敖东药业集团股份有限公司提供;D半乳糖为上海试剂二厂产品，批号为20050422;人参(总)皂苷为市售品;丙二醇试剂盒购自南京建成生物工程研究所.

　　1.2 实验动物 取Wistar大鼠，雌雄各半，体重为180～220g，由延边大学医学部实验动物科提供.

　　2 方法与结果

　　2.1 制首乌对亚急性衰老大鼠血清乳酸脱氢酶活性的影响 取体重为180～220g的Wistar大鼠100只，随机分为10个组，即正常组、模型组、人参皂苷组、生首乌组及黑豆汁制首乌0，2，4，6，8，10h(蒸制时间)组.除正常组外，于颈背部皮下注射给予各组大鼠D半乳糖[3,4]，剂量为50mg/kg，每日1次，建立亚急性衰老模型;每日灌胃给予人参皂苷组大鼠人参皂苷混悬液100mg/kg，每日灌胃给予各何首乌组大鼠相应的生首乌或制首乌浓缩液4.5g/kg，连续42d.每周称取体重1次，调整注射和灌胃剂量.各组大鼠在实验前禁食不禁水12h，腹腔注射100g/L水合氯醛(0.01L/kg)行麻醉，固定，开胸，心脏采血，分离血清，用乳酸脱氢酶试剂盒测定血清乳酸脱氢酶活性.利用SPSS11.0统计软件对实验数据进行单因素方差分析处理，结果示与模型组比较，不同蒸制时间黑豆汁制首乌组大鼠血清乳酸脱氢酶活性明显降低，其中蒸制时间10h组的降低效果最为显著，相比较均有显著性差异(P<0.01，P<0.001)，见表1.

　　2.2 制首乌对亚急性衰老大鼠胸腺及脾脏质量的影响 实验动物分组、给药及观察方法与2.1项下相同.各组大鼠实验前禁食不禁水12h，腹腔注射100g/L水合氯醛(0.01L/kg)行麻醉，固定，开胸，心脏采血，取出胸腺及脾脏称取质量.结果示与模型组比较，不同蒸制时间黑豆汁制首乌组大鼠胸腺及脾脏质量明显增加，相比较均有显著性差异(P<0.05，P<0.01，P<0.001)，其中蒸制时间10h组的脾脏质量增加更为明显，见表1.表1 不同蒸制时间黑豆汁制首乌对亚急性衰老大鼠血清乳酸脱氢酶活性及胸腺、脾脏质量的影响(±SD)

　　3 讨论

　　在一定时间内连续注射给予动物D半乳糖，可使机体细胞内半乳糖浓度升高，在醛糖还原酶催化下还原成半乳糖醇，其不能被细胞进一步代谢而堆积在细胞内影响正常渗透压，导致细胞肿胀，引发功能障碍及代谢紊乱，破坏并消耗机体抗氧化防御系统，使自由基积聚.同时在半乳糖还原成半乳糖醇的过程中产生氧,损伤细胞膜，而使过氧化脂质水平升高，出现衰老[5].乳酸脱氢酶是体内能量代谢过程中的重要酶，几乎存在于所有组织中，当少量组织坏死时,释放入血，使血液中活性升高.本实验结果表明，给予不同蒸制时间制首乌大鼠血清乳酸脱氢酶活性与制首乌蒸制时间呈负相关.研究结果表明，何首乌可提高免疫器官的质量，而胸腺随年龄的增长则逐渐萎缩，使机体胸腺依赖性免疫功能衰退，何首乌可延缓胸腺的退化与萎缩，使老年小鼠胸腺质量和体积明显增大，也可提高老年大鼠胸腺与体重比值[6]，据报道，何首乌可提高小鼠脾脏质量[7],这与本实验结果相符.总之，何首乌可延缓D半乳糖所致大鼠的衰老.

　　【参考文献】

　　[1] 刘惠茹，罗选刚.清蒸、豆制何首乌主要成分比较研究[J].基层中药杂志，2000，14(1)：39.

　　[2] 廖海民，胡正海.何首乌的生物学及化学成分研究进展[J].中草药，2005，36(2)：311.

　　[3] 赵鹏，杨玉英.半乳糖制备亚急性衰老动物模型的可行性[J].中国食品卫生杂志，1999，11(1)：52.

　　[4] 徐智，吴国明，钱桂生，等.大鼠衰老模型的初步建立[J].第三军医大学学报，2003，25(4)：312.

　　[5] 石根勇，吕中明，陈新霞，等.建立衰老模型的实验研究[J].江苏预防医学，2003，14(2)：63.

　　[6] 金国琴，赵伟康.首乌制剂对老年小鼠胸腺、肝脏蛋白质和核酸含量的影响[J].中草药，1994，25(4)：590.

　　[7] 陈肃标，张锦坤.黄芪和何首乌对老龄小鼠脾保护作用的定量研究[J].广东解剖学通报，1994，16(1)：14