野生与栽培北五味子中五味子醇甲的含量测定

　　【摘要】 目的：比较伊春地区野生与栽培北五味子中五味子醇甲成分的含量差别。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为Agilent C18柱(150 mm × 4.6 mm,5 μm)为填充剂，流动相：甲醇-水(13:7);检测波长：250nm;流速：1mL/min;柱温：室温。结果：各产地的北五味子中五味子醇甲含量均大于0. 4%。结论：该实验方法简便、准确、重现性好。

　　【关键词】 北五味子;五味子醇甲;高效液相色谱法;含量测定

　　Extraction of cyperus rotundus volatile oil and protection　of its active components

　　SHEN Defeng,SHAN Panpan,WANG Ruirui,DING Lixin

　　(College of Chemistry and Pharmacy of Jiamusi University，Jiamusi 154007，China;Jiamusi Center Hospital，Jiamusi 154002，China)

　　Abstract：Objective：To extract cyperus rotundus volatile oil and protect its active components.Methods：The steam distillation was used to extract cyperus rotundus volatile oil and the CD inclusion was adopted to protect its active components.The optimum inclusion conditions were established by the orthogonal test,and the nature of the volatile oil was analyzed by TLC before and after inclusion.Results：The optimal conditions were as follows:the inclusion ratio was 1：6 (mL·g-1) and the inclusion temperature at 40℃and the inclusion time 3h.Conclusion：This inclusion is reasonable and the inclusion process does not affect the components of cyperus rotundus volatile oil.

　　Key words：cyperus rotundus volatile oil; CD inclusion; orthogonal test; TLC analysis

　　北五味子为木兰科植物北五味子Schisandra chinensis(Turcz) Baill.的干燥成熟果实。性温味酸、甘，归肺、心、肾经。具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心等功效。用于久嗽虚喘，梦遗滑精，遗尿尿频，久泻不止，自汗盗汗，津伤口渴，内热消渴，心悸失眠等症[1]。木脂素类成分是五味子的主要活性成分[2]，具有抗肿瘤、抗病毒、保肝、抗衰老等作用[3]。在伊春地区有野生五味子资源分布的一些地区，已经开始进行人工种植和人工促进五味子种子繁殖[4]。大量文献表明,五味子中所含的木脂素类成分是其主要的有效成分，且《中华人民共和国药典》对五味子采用了五味子醇甲作为其质量控制的指标，本实验对不同产地北五味子中五味子醇甲进行了含量测定，为生产、使用提供科学参考。

　　1 材料和仪器

　　1.1 材料

　　野生北五味子样品采自黑龙江省伊春市北山国家级森林公园，栽培品选取五营区、上甘岭区、南岔区三地具有较大规模的北药种植基地。经佳木斯大学化学与药学院生药学教研室刘娟教授鉴定为木兰科植物北五味子Schisandra chinensis (Turcz.) Baill.的干燥成熟果实。

　　1.2 仪器

　　Agilent-1100型高效液相色谱仪，美国安捷伦有限公司，KQ-500DE型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件

　　以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相：甲醇-水(13:7);检测波长：250nm;流速：1mL/min;柱温：室温。

　　2.2 对照品溶液的制备

　　精密称定五味子醇甲对照品7.5mg，置50mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得0.1500mg/mL五味子醇甲对照品溶液。

　　2.3 供试品溶液制备

　　取本品粉末(过三号筛)约0.25g，精密称定，置于20mL容量瓶中，加甲醇约18mL，超声处理(功率250W，频率20kHz)20min，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

　　2.4 线性关系的考察

　　精密吸取2、4、6、8、10μL五味子醇甲对照品溶液，进样，以峰面积积分值为纵坐标，五味子醇甲进样量为横坐标绘制标准曲线，计算得回归方程y=1367.6x+10.895，r=0.9996。结果表明五味子醇甲在0.3～1.5μg间呈良好的线性关系。

　　2.5 稳定性试验

　　取伊春产北五味子，按上述供试品溶液制备方法制备。精密吸取同一供试品溶液10μL，按0、2、4、6、8、10h时间间隔，分别进样分析，结果RSD=1.97%，表明供试品溶液制备后10h内测定，五味子醇甲的峰面积无明显变化，说明此时间内，供试品溶液化学性质稳定，可满足实验要求。

　　2.6 精密度试验

　　取同一供试品溶液，精密吸取10μL，连续进样6次，五味子醇甲峰保留时间和峰面积基本一致，RSD为1.79%，表明仪器的精密度良好。

　　2.7 重复性试验

　　取6份伊春区产北五味子粉末，精密称定。按供试品溶液制备方法制备，五味子醇甲峰保留时间和峰面积相符，RSD为1.88%，表明该方法重复性良好。

　　2.8 加样回收率试验

　　精密称取已知准确含量的样品(伊春区产北五味子)0.5g，准确加入己知量的五味子醇甲对照品，按照供试品溶液的制备方法制备成样品。按上述色谱条件测定，计算回收率，本方法回收率较好，方法可行。

　　2.9 样品的测定

　　取伊春各地区北五味子药材，按供试品溶液制备方法制得供试品溶液，精密吸取供试品溶液10μL，按上述色谱条件测定，根据峰面积计算样品中五味子醇甲的含量。结果表明，伊春各地区北五味子药材中五味子醇甲的含量均大于0.40%，其中以伊春区野生北五味子中五味子醇甲的含量为最高。表1 样品测定结果(略)

　　3 讨论

　　以五味子醇甲为对照品，HPLC色谱法测定伊春各地区北五味子药材。其结果是各地区药材五味子醇甲的含量均大于0.40%，实验表明伊春各产地北五味子中五味子醇甲含量均符合药典规定，说明伊春各产北五味子品质均较为优良。

　　【参考文献】

　　[1]中国药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社,2005,169

　　[2]李晓光,高勤,翁文,等.五味子有效部位及其药理作用研究进展[J].中药材,2005,28(2):156159

　　[3]杨慧洁,杨世海.五味子药理作用研究概况[J].人参研究,1999,11(4):58

　　[4]胥克章.北五味子GAP基地的栽培及管理技术[J].农业与技术,2006,26(2):126128