宁夏道地药材银柴胡种子生活力等指标的测定

　　【摘要】 目的：通过对种子生活力等指标的测定，为完善银柴胡种子检验标准操作规程提供实验依据。方法：采用2，3，5-氯化三苯四氮唑(TTC)染色法测定种子的活力。结果：种子生活力测定最佳条件：温度为40℃，TTC浓度为0.2%，染色时间为60min。结论：TTC染色率为93%。

　　【关键词】 银柴胡;种子;TTC;生活力

　　Determination of Seed Viability of Stellaria dichotoma

　　of Ningxia Genuine Traditional Drugs

　　Liu Zhixin1，et al

　　1.Heilongjiang University of Chinese Medicine，the job postgraduate，Harbin Sanjing Pharmaceutical Co.，Ltd

　　Abstract：Objective：To provide the experiment for consummate the Stellaria dichotoma seed viability certification standard through the target determination of the seed and so on.Methods：To determine the seed viability by the TTC dyeing method.Results：Seed viability determination optimum condition：the temperature is 40 ℃，the TTC density is 0.2%，the dyeing time is 60min.Conclusion：TTC dyeing rate is 93%.

　　Key words：Stellaria dichotoma;seed;TTC;viability

　　银柴胡来源于石竹科植物银柴胡Sterllariy dichotomy L.var.lynceolaty Beg.的干燥根。其性微寒，味甘，有大毒;归肝、胃经;具有清虚热，除疳热的功效。

　　20世纪80年代后期，银柴胡人工栽培技术在宁夏获得了成功，目前，已在许多干旱少雨的荒漠地区推广应用，不仅缓解了该药材品种供应紧张的状态，也极大地改善了荒漠地区的生态环境。长期以来，银柴胡种子一直靠采集野生种子，或者作为药材的副产品来生产，市场上提供的银柴胡种子鱼目混珠，质量参差不齐，生产和销售中也缺乏统一的质量标准，影响了药材的质量。为此，我们通过对种子质量标准的相关研究，旨在为进一步推广银柴胡规范化种植技术提供实验依据。

　　1 仪器与试药

　　银柴胡种子采自宁夏六盘山，经宁夏固原药检所鉴定为银柴胡Sterllariy dichotomy L.var.lynceolaty Beg.种子;2，3，5-氯化三苯四氮唑(TTC)试剂由北京中昊生物有限公司提供;稀甘油、水合氯醛试液均按《中国药典》2005年版一部附录ⅩⅤB规定方法配制。Olympus双目显微镜，分析天平(1/103)(上海精密科学仪器有限公司)，DHJ-9140A型电热恒温鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)。

　　2 方法与结果

　　2.1 种子净度的测定：依据《GB/T 3543.3 农作物种子检验规程》，将样品分成净种子、废种子、其他植物种子、杂质四部分，分别称重(0.5g以下精确至0.001g，1～9g者精确至0.01g)。将所称量的各数据记录下来，按以下公式计算净度：种子净度(%)=(试样质量-废种子质量-夹杂物质量)/试样质量×100%。试样质量为10.00g，废种子质量为0.4912g，夹杂物质量为0.2409g，由公式得种子的纯净度为92.7%。

　　2.2 种子水分的测定：依据《GB/T 3543.6 农作物种子检验规程》，采用恒温烘干法测定，首先精密称量恒重后的称瓶(M1)，然后精密量取药用植物种子鲜重(G)，均匀铺在称瓶里，将称瓶迅速放入烘箱中，保持105±2℃，5h后取出，放入干燥器冷却40min后，称取称瓶的重量(M2)。以上称量重复三次，取其平均值，通过下列公式计算种子水分：水分(%)= G-(M2-M1)/G×100%。经称量，G=1.0176g，M1=42.0231g，M2=42.9459g，由公式得种子的水分为9.31%。

　　2.3 千粒重的测定：依据《GB/T 3543.7 农作物种子检验规程》，种子经过净度分析后，随机数取1000粒，重复3次称重。实验测得千粒重为1.7922g。

　　2.4 生活力测定

　　2.4.1 因素水平考察：根据预试验结果，选择TTC溶液浓度、染色时间、染色温度3个因素，每个因素选择3个水平，设定因素水平表，见表1。表1 因素水平表

　　2.4.2 溶液的配制：称取磷酸二氢钾9.078g，磷酸氢二钠11.876g，分别溶于1000mL蒸馏水中，按体积比为2：3混合，作为缓冲液;称取TTC药品1g，溶于100 mL缓冲液中，得1%TTC溶液，pH为6.5～7.5，存放于棕色试剂瓶中，放于暗处，备用。使用时以蒸馏水稀释成不同浓度。

　　2.4.3 染色：将浸好的种子沿中轴纵切(两部分均含胚及胚芽)，放入培养皿中，每个培养皿中100粒。将不同浓度的TTC溶液滴入直至浸没种子，置恒温箱中观察。另取100粒种子放入100℃的沸水中蒸煮10 min后，取出，染色，作为参照。

　　2.4.4 实验结果：以染色率为指标进行分析，结果及方差分析见表2、3。表2 L9(34)正交试验结果表3 方差分析

　　2.4.5 种子生活力测定条件验证试验：为考察上述测定条件，按该条件进行重复试验3次，测定铁棒锤种子染色率，结果平均得率为93%。种子染色情况见附图1。

　　3 讨论

　　种子生活力(Viability)是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力。种子活力是种子重要的品质，高活力种子具有明显的生长优势和生产潜力。对药用植物来说，种子质量的好坏、活力的高低更为重要，它不仅会影响植物的生长，而且直接影响到药材质量，以及人民的用药安全。本实验通过对宁夏道地药材银柴胡种子生活力等指标的测定，确定种子的纯净度、千粒重、水分及生活力，为完善铁棒锤种子检验标准操作规程提供实验依据。

　　【参考文献】

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