一种大鼠高铝模型制作的探索

　　【摘要】 目的：探索一种大鼠高铝模型的制作方法。方法：大鼠尾静脉注射AICI3·6H2O，分别于不同时间段观察进食情况、皮毛情况、反应力、体重改变、大小便变化情况等，以原子吸收法测定血清和尿中铝的含量。结果：模型组与对照组大鼠相比，具有厌食、皮毛不光亮和体重减轻等变化;血中、尿液中铝的含量增加，与制模前差异有统计意义(P<0.01)。结论：本实验成功建立了大鼠的高铝模型，可以为深入研究高铝对大鼠其他生理功能的影响，避免铝损害打下基础。

　　【关键词】 高铝;动物模型;制作

　　Exploring the Constructon of High-alumina Model of Rats

　　Xu shengqiu，et al

　　1.The first peoples hospital of xuzhou，xuzhou，jiangsu，221002，China;

　　Abstract：Objective：To explore the constructon of high-alumina model of rats.Methods：The rats were injected to AICI3·6H2O by vena caudalisat，during the experimental period，the change of take food weght、skin、hair、reaction、bodyweight、shit、urine were observed，and the aluminous content of serum and urine were detected.by atomic absorption method.Results：Following AICI3·6H2O，in the trial group，the results demonstrated that the parameters mentioned above were changed obviously.Conclusion：High-alumina model of rats was constructed successfully，which provided a foundation for the further study.

　　Key words：high-alumina;animal model;model making

　　随着科学技术的进步和人们生活水平的提高，人们对铝的认识也逐步深化，其生物毒性效应也被人们逐渐认识，特别是从事铝的开发利用职业的员工铝损害情况尤为严重。世界卫生组织和联合国粮农组织(WHO/FAO)已于1989年正式将铝确定为食品污染物加以控制，我国于1994年提出了面制食品中铝的限量卫生标准。与其他化学元素的动物模型不同，高铝的动物模型研究相对比较少，尚未形成比较规范的研究方法。本研究采用六水氯化铝(AICI3·6H2O)尾静脉注射给药的方法建立了铝中毒动物模型，用以观察大鼠前后进食情况、皮毛情况、反应力、体重改变、大小便情况和血中、尿液中铝的含量变化等，为进一步研究高铝对生理机能的影响等奠定了实验基础。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 实验动物：健康SD 大鼠，清洁级，鼠龄10月，雌雄各半，体重190～200g。由徐州医学院实验动物中心提供。

　　1.1.2 主要试剂：六水氯化铝(AICI3·6H2O)，上海金山区兴塔美兴化工厂生产，分析纯，批号为080305。

　　1.1.3 主要仪器：wFx-110型原子吸收分光光度计附石墨炉系统(北京瑞利分析仪器公司);铝空心阴极灯;热解涂层石墨管。

　　1.2 方法

　　1.2.1 动物分组、模型建立

　　大鼠适应性饲养3d后，按体重排序进行编号，随机分为正常对照组、高铝模型组，每组10只。高铝模型组以AICI3·6H2O(8mg/kg/d)水溶液高压灭菌后尾静脉注射[1]，对照组注射生理盐水，0.2 mL/只，每连续注射3d休息1d，以便吸收，造模20天。动物房恒温恒湿，温度维持在20±2℃，湿度维持在50±5%，每日更换垫料，作清洁处理。

　　1.2.2 实验动物活体观察指标：(1)基本生活习性观察：观察实验组给药后大鼠的生活习性，例如：饮食情况、活动度、精神状态、皮毛情况、反应力、大小便情况等。(2)体重测定：分别于造模前和后4、8、12、16、20天对每只大鼠进行称重。

　　1.2.3 血清和尿液中铝含量测定[2]

　　分别于造模前和后20天取大鼠股静脉血3ml，于离心管内离心后分离血清;取晨尿中段作为尿样，将血清与尿样封存于聚乙烯管中。样品测定前存放于-20℃，低温冰箱中。实验中使用的所有容器均用5%硝酸浸泡3d，每日更换一次新酸，测定前用去离子水冲净、干燥。采用鼠主动脉采集约2 ml血样，置于处理过的试管(酸处理并干燥后加0.1 ml 2%肝素钠，60℃烘干后备用)中，摇匀放于4℃冰箱，备用。按仪器说明书，采用石墨炉原子吸收法测定血清和尿中铝。

　　1.3 统计分析采用SPSS 10.0软件进行统计学分析，计量资料均数用x±s表示，组间比较采用两个独立样本的t检验。

　　2 结果及分析

　　造模组与对照组均没有出现大鼠死亡，均达到了研究终点。

　　2.1 体重变化：实验组给予高铝后，明显表现厌食、少动、精神萎靡，皮毛粗糙、反应力下降、大便腹泻、小便发黄，两组动物体重差异有显著性，结果见表1。表1 造模前后大鼠体重对比情况

　　2.2 血清中铝含量和尿铝含量检测造模前后血清中铝含量和尿铝含量，成模后模型组大鼠的血清中铝含量和尿铝含量与对照组相比差异有显著性(P <0.01)，结果见表2。表2 两组大鼠的血清中铝含量和尿铝含量比较

　　3 讨论

　　铝是环境中含量最丰富的化学元素之一，广泛的存在于日常生活中。FAO/WHO于1989年正式将铝确定为食品污染物加以管理。研究证实，慢性铝暴露是导致中枢神经系统病变和其他系统病变的重要环境因素[3-5]。国人由于饮食习惯等原因，对铝的摄入量可能更加多，受其危害也更加大[6]。百色地区及周边地区从事铝行业的职工铝损害情况尤为严重。

　　复习文献，既往报道的高铝模型制作中多数采用的是口服给与高铝制剂，经胃肠道吸收造进行高铝负荷建模。这种模型可以称为慢性损伤模型，优点是模拟了自然状态下的铝中毒情景，不足之处在于所需时间较长，干扰因素比较多，组间差异较大。部分研究采用小鼠侧脑室内注射微量的AlCl3的方法建立高铝负荷动物模型，优点是造模时间短，成功率比较高，但是显然与自然状态下铝的摄入途径有很大差异。

　　经尾静脉注射给药的方法是一种安全有效的研究方法，克服了口服给药或腹腔注射高铝制剂以及侧脑室内注射给药的不足，模型制作成功率高并且符合自然状态下铝中毒的情景。本研究中模型组大鼠成模后出现的各项指标改变与既往的研究结论基本一致[1][7-8]，因此我们判断这种大鼠高铝模型的制作是成功的。本模型的成功建立为深入研究高铝对大鼠的各项生理功能的影响提供了基础，我们将在以后的工作中进一步完善该模型的制作。

　　【参考文献】

　　[1] 李秋营，杨艳旭，张太强，等.实验性大鼠铝中毒模型建立[J].山西医药杂志，2002，31(2)：113.

　　[2] 郭智勇，何玉华等.石墨炉原子吸收法测定人血清和尿中铝[J].中国卫生检验杂志，2001，11(3)：311.

　　[3] Poole RL，Schiff L，Hintz SR，et al.Aluminum content of parenteral nutrition in neonates：measured versus calculated levels[J].J Pediatr Gastroenterol Nutr.2010，50(2)：208-11.

　　[4] Erazi H，Sansar W，Ahboucha S，et al.Aluminum affects glial system and behavior of rats[J].C R Biol.2010，333(1)：23-27.

　　[5] Rodella LF，Ricci F，Borsani E，et al.Aluminum exposure inducesAlzheimer′s disease-like histopathological alterations in mouse brain[J].Histol Histopathol，2008，23(4)：433-439.

　　[6] Wong WW，Chung SW，Kwong KP，et al.Dietary exposure to aluminium of the Hong Kong population.Food Addit Contam Part A Chem Anal Control Expo Risk Assess.2010，27(4)：457-63.

　　[7] 刘彦慧，田心.六味地黄方对慢性铝暴露痴呆大鼠记忆功能保护作用的研究[J].中国老年学杂志，2009，10(29)：2455-2457.

　　[8] 张鹏，杨俊卿，苏强.咖啡酸对慢性铝过负荷致大鼠脑损伤的保护作用[J].中国药理学通报，2009，25(2)：197-200.