EGFR和SBEM联合检测在乳腺癌外周血微转移中的意义

　　【摘要】 　　目的：探讨乳腺癌患者外周血表皮生长因子受体(EGFR)及乳腺上皮粘蛋白(SBEM)的表达及临床意义。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)定量检测58例乳腺癌患者及30例乳腺纤维腺瘤患者术前血清中EGFR和SBEM的含量。结果：乳腺癌组术前血清EGFR和SBEM含量均高于纤维腺瘤对照组 (P<0.01)。有淋巴结转移的乳腺癌患者血清中EGFR和SBEM含量明显高于无淋巴结转移者,Ⅲ+Ⅳ期患者血清中EGFR和SBEM含量亦显著高于Ⅰ+Ⅱ期，差异均有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者术前血清中EGFR和SBEM含量无相关性(r=-0.45,P=0.74)。结论：EGFR及SBEM特异性表达于乳腺癌外周血，有可能作为检测乳腺癌外周血微转移的标志物，并有可能在乳腺癌微转移诊断和预后判断中具有重要意义。

　　【关键词】 表皮生长因子受体 乳腺上皮粘蛋白 乳腺癌

　　Detection of EGFR and SBEM in peripheral blood from patients with breast cancer and its significance

　　ZHANG Di, HUANG Yanchun

　　(Department of Clinical Laboratory, Affiliated Tumor Hospital, Xinjiang Medical University，Urumqi 830011, China)

　　Abstract: Objective: To explore the expressions of epidermal growth factor receptor (EGFR) and small breast epithelial mucin (SBEM) in peripheral blood from patients with breast cancer and their clinical significance. Methods: The expressions of EGFR and SBEM in serum were detected from 58 patients with breast cancer, 30 breast fibroadenoma by enzymelinked immunosorbent assay (ELISA). Results: Compared with breast fibroadenoma group, the levels of serum EGFR and SBEM in breast cancer were much higher (P<0.01). The levels of serum EGFR and SBEM of patients with lymph node metastasis were significantly higher than those in the negative, and the levels of patients in stages Ⅲ+Ⅳ were also significantly higher than those in the stagesⅠ+Ⅱ (P<0.05). The serum EGFR level was not correlated with the serum SBEM level (r=-0.45,P=0.74). Conclusion: EGFR and SBEM are specifically expressed in peripheral blood of breast cancer patients, and each of them may be marker of micrometastasis of breast cancer.

　　Key words: epidermal growth factor receptor(EGFR); small breast epithelial mucin (SBEM); breast cancer

　　近年来，中国乳腺癌的发病率在女性恶性肿瘤中已跃居首位[1]。大约有30%的乳腺癌患者最终发生远处转移[2]。乳腺癌转移无固定模式,早期乳腺癌即可发生隐匿性转移。血液循环中的肿瘤细胞是导致乳腺癌血行转移和复发的重要原因之一，因此，早期外周血微转移的检测，对指导乳腺癌临床治疗和判断预后具有重要意义。我们采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测乳腺癌患者外周血中EGFR和SBEM的表达，探讨其在乳腺癌微转移中的临床意义。

　　1材料与方法

　　1.1研究对象选择2008年3月～2008年8月在我院行手术治疗，无肝炎以及免疫系统疾病等合并症，经病理确诊为乳腺癌和乳腺纤维腺瘤的患者88例。其中乳腺癌组58例，患者均为女性,年龄30～77岁,平均年龄50.1岁,中位年龄48.5岁。浸润性导管癌48例,髓样癌2例,粘液癌2例,浸润性小叶癌3例，混合型癌(浸润性导管癌和浸润性小叶癌)3例。按照UICC1988年制订的乳腺癌TNM分期标准：Ⅰ期15例，Ⅱ期21例，Ⅲ期19例，Ⅳ期3例。良性对照组均为乳腺纤维腺瘤，患者均为女性,年龄27～49岁,平均年龄38.9岁,中位年龄39岁。所有患者术前未接受过放化疗或生物治疗等干预措施。

　　1.2方法

　　1.2.1标本采集两组均抽取空腹静脉血2 ml于真空采血管(含分离胶，美国BD)内，静置1 h，以3 000 r/min离心10 min分离血清，-20 ℃冰箱保存待测。

　　1.2.2实验方法两组均采用ELISA法测定，试剂盒均购自美国R&D Systems公司，检测步骤严格按试剂盒说明书进行。ELISA数据分析由TECAN全自动酶标仪RMP150型读取。EGFR单位为fmol/L, SBEM单位为ng/ml。

　　1.3统计学处理用SPSS13.0软件包进行统计学处理。采用非参数统计方法,数据以中位数(Median，M)及四分位数间距(Quartiles，Q)表示。两组数据的比较应用完全随机设计两样本比较的秩和检验,相关分析应用Spearman等级相关。检验水准α=0.05。

　　2结果

　　2.1两组术前血清EGFR和SBEM含量的比较乳腺癌组术前血清EGFR含量91.7(22.3,264.6) fmol/L高于纤维腺瘤对照组20.9(26.9,55.6) fmol/L，差异有统计学意义(Z=-4.213，P<0.01);乳腺癌组术前血清SBEM含量4.8(1.8,9.3) ng/ml高于纤维腺瘤对照组1.2(0.98,2.1) ng/ml，差异有统计学意义(Z=-3.411，P<0.01)。

　　2.2乳腺癌患者术前血清中EGFR和SBEM含量与乳腺癌病理特征的关系有淋巴结转移的乳腺癌患者血清中EGFR和SBEM含量明显高于无淋巴结转移者，Ⅲ+Ⅳ期患者血清中EGFR和SBEM含量亦显著高于Ⅰ+Ⅱ期，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

　　2.3乳腺癌患者术前血清中EGFR和SBEM含量的相关性通过Spearman相关性分析，乳腺癌患者术前血清中EGFR和SBEM含量无相关性(r=-0.45，P=0.74)。

　　表1乳腺癌患者术前血清中EGFR和SBEM含量与乳腺癌病理特征的关系(略)

　　注： *P<0.05, **P<0.01

　　3讨论

　　EGFR基因定位于7p11～17，表达产物是由1 186个氨基酸组成的单链跨膜糖蛋白，在与EGF等配体结合后能激活受体酪氨酸激酶，自身及胞浆中多种蛋白质底物磷酸化，转导持续分裂信号到细胞内膜，引起细胞恶性增殖[3]。已有许多报道指出，在头颈部鳞癌、乳腺癌、胃癌、肠癌、肝癌中的EGFR均有过度表达 ,提示肿瘤的细胞分化、浸润转移能力强 ,患者预后不良[4-6]。由于EGFR及其配体在多种肿瘤的发生发展中起重要作用,因此针对EGFR酪氨酸激酶的抗肿瘤治疗和EGFR的检测成为近年来肿瘤研究的热点。乳腺上皮粘蛋白(SBEM)是2002年Miksicek RJ等[7]首次报道的一种新的用于检测乳腺癌微转移的标志物，该蛋白表达具有特异性，仅在乳腺和唾液腺中表达，可作为临床早期诊断乳腺癌生物学标志物[8-9]。本研究采用ELISA方法定量检测患者外周血中EGFR和SBEM的含量，有重复性好、对患者的损伤小和标本易获得等优点，而且可以实现自动化操作，价格较PCR方法便宜，使其有望成为临床常规检测项目[10-11]。本实验结果显示，EGFR、SBEM在乳腺癌和纤维腺瘤对照组术前血清中含量差异有统计学意义(P<0.01)，提示EGFR、SBEM可能成为检测乳腺癌外周血微转移的特异性指标;且有淋巴结转移的乳腺癌患者血清中EGFR和SBEM含量明显高于无淋巴结转移者，Ⅲ+Ⅳ期患者亦显著高于Ⅰ+Ⅱ期，差异有统计学意义(P<0.05)，说明EGFR或SBEM高表达是乳腺癌恶性程度高的一个原因，在乳腺癌的浸润和转移过程中发挥了重要作用，EGFR或SBEM表达水平越高，患者发生转移的可能性越大。本实验结果显示，乳腺癌患者术前血清中EGFR和SBEM含量无相关性，提示两者可以作为乳腺癌微转移独立的指标。不论淋巴结转移阳性与否，患者其中任一项高表达都应考虑具有潜在转移的危险 ,因此临床上应慎重对待，有计划地给予恰当的综合治疗 ,并严密观察长期随访。综上所述 , EGFR、SBEM作为乳腺癌外周血微转移的检测指标 ,具有高度特异性 ,对于乳腺癌的诊断、治疗及长期监测起着非常积极的作用。若能增加样本量并对其长期动态监测、随访,有可能成为乳腺癌独立的预后指标。

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