实时荧光PCR在男性性病尿道炎及男性尿道炎后综合征的应用评价

　　【摘要】 目的 探讨实时荧光PCR技术检测男性性病尿道炎及男性尿道炎后综合征(MPUS)患者的病原体的临床价值。方法 用实时荧光PCR法对718例男性性病尿道炎及MPUS患者尿道分泌物或前列腺液同时作淋球菌(NG)、沙眼衣原体(Ct)、解脲支原体(UU)检测。结果 52.2%的淋病患者并发Ct、UU感染。非淋菌性尿道炎(NGU)患者Ct、UU阳性率68.2%，Ct阳性率31.1%、UU阳性率42.6%，5.4%患者Ct、UU合并感染。MPUS患者NG、Ct、UU阳性率仅为10.2%。结论 实时荧光PCR技术灵敏度高，特异性强，对男性性病尿道炎及MPUS的诊断和治疗具有重要的指导意义。

　　【关键词】 男性性病尿道炎;男性尿道炎后综合征;病原体;实时荧光PCR

　　Evaluation of real-time PCR in male′s sexually transmitted urethritis

　　and male′s post- urethritis syndrome

　　MA Haijun

　　(Department of Dermatology, Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, Xuzhou, Jiangsu 221002, China)

　　Abstract: Objective To discuss the clinical effectiveness of real-time PCR in detecting the pathogens of male′s sexually transmitted urethritis and male′s post-urethritis syndrome (MPUS). Methods Real-time PCR was used to detect the pathogens including Neisseria gonorrhoeae (NG), Chlamydia trachomatis (Ct) and Ureaplasma urealyticum (UU) in the urinary secretions or succus prostaticus from 718 male patients with sexually transmitted urethritis and/or post-urethritis sydrome. Results The prevalence of Ct and UU was 52.2% in the gonorrhoea patients and was 68.2% in the patients with nongonococcal urethritis (NGU). The positive rate was 31.1% for Ct and 42.6% for UU in NGU and the co-infection rate of Ct and UU was 5.4%, while the total prevalence of Ct, NG and UU was only 10.2% in the MPUS patients. Conclusion The technique of real-time PCR has very high sensitivity and specificity. It serves as significant guidance in the diagnosis and treatment of male′s sexually transmitted urethritis and MPUS.

　　Key words: male′s sexually transmitted urethritis; male′s post-urethritis syndrome; pathogen; real-time PCR

　　已换 男性性病尿道炎是常见的性传播疾病之一，其实验室诊断依据为检测患者尿道分泌物或前列腺液中的病原体，包括淋球菌(NG)、沙眼衣原体(Ct)、解脲支原体(UU)。目前，检测病原体方法很多，实时荧光PCR技术是比较敏感的方法。为评价实时荧光PCR技术在男性性病尿道炎及男性尿道炎后综合征(male′s post-urethritis sydrome，MPUS)诊治中的价值，我们对718例男性性病尿道炎及MPUS患者尿道分泌物或前列腺液同时检测NG、Ct、UU并进行分析。结果报道如下。

　　1 资料和方法

　　1.1 一般资料 718例男性性病尿道炎及MPUS患者均来自我院皮肤科门诊，其中男性性病尿道炎238例，MPUS 480例。718例患者均有不洁性交史，年龄18～62岁，平均38岁。男性性病尿道炎均为未经治疗的初诊患者，表现为尿频、尿急、尿道痒痛不适，有黄色分泌物或少量稀薄微浊分泌物或无分泌物。MPUS患者均经外院诊治过或过度治疗过而始终有尿频、尿急、尿痛等不适症状，病程3～12个月，外院实验室检查NG、Ct、UU均阴性(非实时荧光PCR法)。

　　1.2 样本采集 有尿道分泌物的患者取样：用无菌棉拭子粘取尿道口分泌物洗于装有1 ml生理盐水的塑料离心管中待检。无分泌物的患者取样：向尿道口方向轻轻按摩尿道1 min，用无菌棉拭子插入尿道2 cm 处粘取尿道按摩液洗于装有1 ml生理盐水的塑料离心管中，然后作前列腺按摩，取1滴前列腺液滴于按摩液离心管中待检。

　　1.3 试剂 沙眼衣原体和淋球菌核酸扩增(PCR)荧光双检试剂盒、解脲支原体核酸扩增(PCR)荧光检测试剂盒由深圳匹基生物工程有限公司提供。

　　1.4 实验操作 按试剂盒说明书步骤进行标准操作。本研究采用的荧光PCR仪为美国ABI公司生产的ABI 7300基因扩增仪。

　　1.5 统计学处理 各病原体阳性率显著性差异用χ2检验, P<0.05认为差异有显著性。

　　2 结 果

　　男性性病尿道炎根据检测结果有无淋球菌而分为淋病和非淋菌性尿道炎(NGU)。各病原体在淋病、NGU、MPUS中的检测结果见表1。结果显示：52.2%(47/90)的淋病患者并发Ct、UU感染,合计阳性率100%(90/90);NGU患者Ct阳性率31.1%(46/148)、UU阳性率42.6%(63/148)，Ct、UU合并阳性率5.4%(8/148),合计阳性率68.2%(101/148);MPUS患者NG阳性率4.4%(21/480)、Ct阳性率2.1%(10/480)、UU阳性率5.4%(26/480),合计阳性率10.2%(49/480)。淋病与NGU患者3种病原体阳性率明显高于MPUS患者(P<0.01)，3组病例UU阳性率要高于Ct阳性率，但差异无显著性(P>0.05)。表1 淋病、NGU、MPUS患者 3种病原体检测结果

　　3 讨 论

　　男性性病尿道炎通常根据是否有淋球菌存在分为淋菌性尿道炎和NGU[1]。MPUS是指淋病或NGU，经过多种抗菌药物治疗后已无尿道炎的临床及实验室客观依据，但患者仍诉诸多症状和不适的症候群[2]。

　　淋病、NGU实验室诊断依据为检测患者泌尿生殖道病原体，包括NG、Ct、UU。判断是否治愈不能仅看临床症状，有时经过标准治疗后症状虽然消失，但仍可有少量病原体存在。尤其是近年来抗菌药物的大量使用使我国性传播疾病患者的耐药情况较国外严重，这就要求对患者作微生物学随访[3]。另外有相当部分淋病、NGU患者经治疗后迁延为MPUS患者，MPUS病因复杂，病程长，且反复，临床上大多以前列腺炎或复发性尿道炎给予大剂量的抗菌药物治疗，但效果多不佳[4]。故精确的病原学实验室检测对淋病、NGU、MPUS的诊治和解决患者心理恐惧有极为重要的意义。目前，检测NG、Ct、UU的方法很多，不同实验室因人员和设备等因素而选用的方法多种多样，故各地报道的病原体流行病学结果相差很大。应选择一个实用且更能反映临床真实情况的实验方法。培养法仍然是金标准，但耗时长，敏感性低，不适合临床广泛开展[5]。实时荧光PCR法是近几年来发展较快的方法之一，因该方法操作简单，检测速度快，判断结果自动化等优点而倍受实验室技术人员的青睐。我们应用实时荧光PCR法对患者进行检测，结果表明52.2%淋病患者合并Ct、UU感染，NGU患者Ct、UU 阳性率68.2%，而MPUS患者3种病原体阳性率仅为10.21%。表明实时荧光PCR法灵敏度高、特异性强。且笔者认为单凭某个实验室的单次检测结果诊断MPUS有些不妥，有部分尿道炎慢性迁延患者可能尚有病原体耐药菌株存在。同时对于男性性病尿道炎及MPUS患者进行实时荧光PCR法检测NG、Ct、UU有标本用量小的优点，一次取样即可作3种病原体检测。综上所述，实时荧光PCR法对男性性病尿道炎及MPUS的诊断和治疗具有重要的指导意义。

　　【参考文献】

　　[1] 吴志华.现代皮肤性病学[M].广州：广东人民出版社，2002:337-338.

　　[2] 赵天恩,刘清英. 男性尿道炎后综合征的研究进展[J]. 中国皮肤性病学杂志,2002, 16(4):277-279.

　　[3] 刘全忠.对衣原体泌尿生殖道感染诊疗指南的思考[J].中华皮肤科杂志,2007, 40(12):776.

　　[4] 梁志明,帅春海.485例男性尿道炎后综合征前列腺液检查及分析[J].中国麻风皮肤病杂志,2006, 22(5):392-393.

　　[5] 陈小玫. 非淋菌性尿道炎实验室诊断研究进展[J]. 中国麻风皮肤病杂志,2007, 23(1):43-45.