HPLC测定抗敏鼻炎灵胶囊中麻黄碱的含量

　　【摘要】 建立抗敏鼻炎灵中麻黄碱含量测定HPLC方法。[方法]色谱条件：色谱柱：DiamonsilTM(钻石)C18(250mm×4.6mm，5μm);流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸二氢--钾溶液(含0.2%三乙胺，用磷酸调PH值至2.7)=(5∶95)，流速为1.0ml/min，检测波长为210nm，柱温30℃。[结果]盐酸麻黄碱线性范围0.2148～2.148μg/ml，r=0.9999;平均回收率为98.85%，RSD=2.95%。[结论]该方法简便，准确，重现性好，可作为测定抗敏鼻炎灵中麻黄碱含量的方法。

　　【关键词】 抗敏鼻炎灵胶囊;盐酸麻黄碱;HPLC

　　Determination of Ephedrine in KMBYL Capsules by HPLC Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine，Hangzhou(310053)Abstract： [Objective] To establish a method for determination of Ephedrine Hydrochloride in KMBYL capsules by HPLC. [Methods] The DiamonsilTM C18(250mm×4.6mm，5 μm)column was used. The mobile phase was mobile phase： acetonitrine-0.02 mol·L-1potassium dihydrogen phosphate (0.2% triethylamine, adjusteding pH to 2.7 with phosphoric acid) (5∶95) with a flow rate of 1.0ml·min-1. The detection wavelength was 210 nm. The column temperature was 30℃. [Results] The linear responses range was 0.21482.148 μg?mL-1 of Ephedrine Hydrochloride (r=0·9999). The average recovery was 98.85% and the RSD was 2.95%.[Conclusion] The method is simple accurate reproducible.It can be used for the quality control of KMBYL Capsules.

　　Key words： KMBYL Capsules; Ephedrine;‘ HPLC’

　　过敏性鼻炎是一种常见病，发病者约占人群的10%，流行病学调查过敏性鼻炎和过敏性咳嗽发病率均有逐年增加的趋势[1]，已成为全球关注的公众卫生问题[2]。西药控制过敏性鼻炎疗效虽然显著，但常伴有副作用，而中药或中药复方防治过敏性鼻炎有其独特的优势[3]。抗敏鼻炎灵胶囊是根据国家名老中医三十年中医临床有效处方研制而成，主要由北沙参、苍耳子、徐长卿、麻黄等七味药组成，具有补益肺肾，祛风润燥，通鼻窍等功效。临床用于治疗鼻塞不通，喷嚏流涕，前额疼痛等过敏性鼻炎、慢性鼻炎诸症。本实验建立了HPLC法测定抗敏鼻炎灵胶囊中盐酸麻黄碱含量的方法，为制定抗敏鼻炎灵胶囊质量标准提供实验依据。

　　1 仪器与试药

　　日本岛津Shimadzu LC10AT高效液相色谱仪，SPD10AVP紫外检测器，浙江大学N2000色谱工作站。盐酸麻黄碱对照品(编号07149402)(中国药品生物制品检定所)。甲醇、乙腈为色谱纯(美国Tedia公司)，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。抗敏鼻炎灵胶囊(批号：20051003～0051012)由浙江中医药大学中药资源工程重点实验室制备。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件系统适用性

　　色谱柱：DiamonsilTM(钻石)C18(250mm×4.6mm，5μm);流动相：乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(含0.2%三乙胺，用磷酸调PH值至2.7)=(5∶95)，流速为1.0ml/min，检测波长为210nm，柱温30℃。理论板数按盐酸麻黄碱计算，不低于3000。在此条件下，盐酸麻黄碱与其它组分均能达到基线分离。

　　2.2 对照品液的制备

　　精密称取盐酸麻黄碱对照品5.37mg，加甲醇制成每1mL中含盐酸麻黄碱53.7μg的溶液，摇匀，即得。

　　2.3 供试品液的制备

　　取抗敏鼻炎灵胶囊内容物2g，精密称定，置蒸馏瓶中，加水10mL，NaCl 7.5g混匀，加入20%NaOH溶液150mL，蒸馏，收集馏出液145ml，用1.0mol/L的HCl溶液调PH值，使馏出液呈弱酸性，最后用蒸馏水定容至150ml，吸取2ml过膜，作为供试品溶液。

　　2.4 阴性对照液的制备

　　按处方比例及工艺，制备缺麻黄的阴性对照样品，再按供试品溶液的制备方法制备阴性样品溶液。

　　2.5 线性关系考察

　　取盐酸麻黄碱对照品溶液53.7μg/ml，精密吸取4，10，20，30，40μl注入液相色谱仪，记录峰面积，得到以盐酸麻黄碱进样量(μg)为横坐标，以峰面积积分值为纵坐标的标准曲线，并得到回归方程：Y=2427745X+72674，r=0.9998。盐酸麻黄碱在进样量为0.2148～2.148μg范围内具有良好线性关系。

　　2.6 精密度试验

　　精密吸取同一供试品溶液20μl，重复进样5次，测得盐酸麻黄碱峰面积的RSD为0.39%(n=5)，说明仪器性能良好。

　　2.7 稳定性试验

　　取同一供试品溶液，分别于0，1，2，4，8，12，24h进样20μl，按上述色谱条件测定，记录色谱峰面积，RSD为0.97%，说明供试液在24h内稳定。

　　2.8 重现性试验

　　取同一批号样品(批号：20051006)，按供试品溶液的制备方法平行制备6份，按上述含量测定方法测定并计算盐酸麻黄碱含量，结果盐酸麻黄碱的平均含量为1.313mg/g，RSD=2.78%(n=6)，表明本方法重复性较好。

　　2.9 回收率试验

　　精密称取已知含量的样品(批号：20051006)9份，精密加入盐酸麻黄碱对照品适量，按上述色谱条件测定含量并计算回收率，结果见表1。表1 加样回收率(略)

　　2.10 样品测定

　　取10批样品，按供试品溶液的制备方法制备，每批平行制备3份，分别精密吸取对照品溶液和样品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算含量，结果见表2。表2 样品含量测定(略)

　　3 讨论

　　3.1 测定指标的选择

　　抗敏鼻炎灵处方中麻黄具有发汗散寒，宣肺平喘等作用[4]，其主要有效成分为盐酸麻黄碱，药理实验表明，盐酸麻黄碱有收缩血管、兴奋中枢神经作用，有类似肾上腺样作用，缓解平滑肌痉挛等。由此,课题组选择了盐酸麻黄碱作为抗敏鼻炎灵胶囊指标成分，并建立了HPLC测定方法。

　　3.2 色谱条件的选择

　　盐酸麻黄碱的含量测定：曾参考中国药典2005年版一部麻黄项下含量测定方法，以乙腈-0.1%磷酸(9∶87)为流动相，经PH试纸测试，显示该流动相酸性较强(在2.0左右)，为避免损坏色谱柱，改用乙腈-0.01%磷酸(9∶87)，结果显示阴性对照液色谱峰有干扰，后调整流动相比例，则显示盐酸麻黄碱对照品色谱峰有拖尾，说明该溶剂展开系统不合适。后参考《中国药典》2005版一部“通宣理肺丸”项下含量测定方法色谱条件[4]，流动相：乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(含0.2%三乙胺，用磷酸调PH值至2.7)(3∶97)，检测波长210nm，流速1.0ml/min，柱温30℃，流动相比较了(5∶95)，结果在流动相为(5∶95)时保留时间适宜，理论塔板数、对称性、分离度等均能达到要求，因此将此色谱条件定为盐酸麻黄碱含量测定的最佳条件。

　　【参考文献】

　　1]李彩青.儿童过敏性鼻炎与过敏性咳嗽的关系及中西医治疗[J].基层医学论坛，2008，12(3)：239.

　　[2]刘恩梅，杨锡强.过敏性疾病研究进展与展望[J].实用儿科临床杂志，2007，22(21)：1603.

　　[3]陈文.抗过敏性鼻炎的中西药研究现状[J].石河子大学学报(自然科学版)，2005，23(1)：125.

　　[4]中华人民共和国药典委员会.中国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社，2005：224,588.