音乐疗法对心理应激兔血脂的影响及机制

　　【摘要】 目的 观察音乐疗法对心理应激兔血脂水平的影响，并探讨其可能机制。方法 将40只雄性新西兰大白兔随机分为对照组(A组，n=10)，音乐组(B组，n=10)，心理应激组(C组，n=10)和心理应激加音乐组(D组，n=10)。B组每天听小提琴协奏曲—梁山伯与祝英台4?h，C组进行慢性不可预见性心理应激，D组除进行慢性不可预见性心理应激外，每天听小提琴协奏曲—梁山伯与祝英台4?h。试验周期为8周。于试验前后测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDLc)、高密度脂蛋白(HDLc)、HDLc/LDLc值以及神经肽Y(NPY)的浓度，分离腹主动脉进行油红O染色，观察脂质含量。结果 与C组相比，D组的LDLC、TC和TG浓度均显著降低(P<0.05)，而HDLc/LDLc显著升高(P<0.05)，油红O脂质染色面积显著小于C组(P<0.05)，NPY浓度和血脂浓度亦明显低于C组(P<0.05)。结论 音乐疗法可以明显缓解长期慢性心理应激所导致的血脂代谢紊乱，其降脂作用可能与抑制NPY的释放有关。

　　【关键词】 音乐疗法;脂质;神经肽Y;兔

　　serum lipids in psychological stress rabbit models

　　ZHAO Li, SUN Ping, YAN Fangfang, LIU Yan, ZHAO Yuxia

　　(Key Laboratory of Cardiovascular Remodeling and Function Research, Chinese Ministry of Education and

　　Chinese Ministry of Public Health, Department of Traditional Chinese Medicine,

　　Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, China)

　　To observe the effects of music therapy for the concentration of serum lipids of psychological stress rabbit models and to investigate its possible mechanism. Methods Forty New Zealand male rabbits were randomly divided into 4 groups: the control group (A), the music group (B), the psychological stress group (C) and the psychological stress plus music group (D). Group B was given music 4 hours each day. Group C was given psychological stress. Group D was given music 4 hours and psychological stress each day. The experiment period was 8 weeks. The concentrations of total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low density lipoprotein (LDL), high density lipoprotein (HDLc), and neuropeptide Y (NPY) were determined at the beginning and end of the experiment, and HDL/LDL was calculated. At the end of the experiment, abdominal aorta of the rabbits was taken out and dyed with rathonum red O which was used to examine the degree of lipidoses in vessel walls. Results The concentration of TC, TG, LDL, HDL, NPY and HDL/LDL was significantly different between group A and group C (P<0.05) and between group C and group D (P<0.05), the quantity of lipidoses in the vessel walls of group D was obviously less than that of group C. Conclusions Music therapy can alleviate increased serum lipids induced by chronic psychological stress, and the mechanism might relate to music controlling NPY secretion.

　　Key words: Music therapy; Lipids; Neuropeptide Y; Rabbits

　　音乐疗法可通过消除紧张、焦虑、忧郁、恐惧等不良心理情绪改善神经系统的功能，从而防治心身疾病。本实验通过建立慢性心理应激兔模型，观察音乐疗法对其血脂水平的影响，并探讨其可能的机制。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料 健康纯种雄性新西兰大白兔40只，体质量1.5～2.0?kg，购自山东省农业科学院实验动物中心(合格证号：0004455)。普通饲料购自山东省科学院动物实验中心。噪音盒，电击箱，旋转器为自行设计制作。

　　1.2 方法

　　1.2.1 动物模型的建立与分组 40只雄性新西兰大白兔适应性喂养1周后，进入实验。随机分为四组，每组10只。正常对照组(A组);音乐组(B组，于每天18：00～22：00听小提琴协奏曲—梁山伯与祝英台，55～65?dB);心理应激组(C组，给予慢性不可预见性心理应激造模)和心理应激加音乐组(D组，给予慢性不可预见性心理应激造模的同时，每天18：00～22：00听小提琴协奏曲—梁山伯与祝英台，55～65?dB)。以上四组均给予普通饮食，试验周期共为8周。

　　慢性不可预见性心理应激造模：第1天噪音刺激1?h，第2天旋转30?min(80?r/min)，第3天狗惊吓30?min(在大笼子里加一道栅栏，将其一分为二，一边放狗，一边放实验兔)，第4天把兔子放进塑料网兜悬挂3?h，第5天足底电击30?min(110?V，1次/min)，第6天断水24?h，第7天断食24?h，以7?d为1个周期。造模结束之后通过检测血浆皮质醇浓度、动物体质量、体温、修饰行为等[89]的改变评价模型成功与否。

　　1.3 血脂的检测 于试验前、后经兔耳中央动脉抽取空腹血，在日本Olympus AU1000全自动生化分析仪上测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDLc)，高密度脂蛋白(HDLc)的浓度。

　　1.4 神经肽Y(NPY)浓度的检测 采用北京东亚免疫技术研究所提供的NPY放射免疫分析试剂盒测定血清NPY的浓度。

　　1.5 油红O染色 8周末处死动物，取其腹主动脉标本，置于10%中性缓冲福尔马林溶液中浸泡固定48?h以上，用OCT冰冻包埋，将其横断面制成6?μm厚度连续切片，做油红O染色。采用Olympus BX50显微摄影系统、IPP图像分析软件进行图像分析，计算阳性染色百分比。

　　1.6 统计学处理 数据以±s表示。组内比较服从正态分布的资料采用t检验，非正态分布资料采用秩和检验，组间差异性比较采用单因素方差分析，由SPSS 11.5统计软件完成。P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结 果

　　2.1 血脂浓度的变化 见表1。与对照组相比，心理应激模型组血清LDLc、TC和TG浓度均显著升高(P<0.05)，而HDLc/LDLc的值显著降低(P<0.05);与心理应激模型组相比，心理应激加音乐组血清LDLC、TC和TG浓度均显著降低(P<0.05)，而HDLc/LDLc的值显著升高(P<0.05);但心理应激加音乐组、音乐组与对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。

　　*2.2 血清NPY浓度变化 见表2。与对照组相比，心理应激模型组血清NPY浓度明显升高(P<0.05)，与心理应激模型组相比，心理应激加音乐组血清NPY浓度显著降低(P<0.05)，但心理应激加音乐组、音乐组与对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。

　　3 讨 论

　　心理应激在现代社会人群中普遍存在。心理应激可以使血脂升高，导致动脉粥样硬化(AS)甚至急性冠脉综合症(ACS)的发生。如何提高机体自身的调节能力，缓解和预防心理应激对机体的危害，已成为现代医学亟待解决的问题。

　　音乐是一种与语言及其他声音既相似又不同的特殊信息，通过声波有规律的频率变化，作用于大脑皮质，并对丘脑下部和边缘系统产生效应，提高皮层神经的兴奋性，活跃和改善情绪状态，消除外界精神心理因素所造成的“紧张状态”，调节激素分泌从而提高应激能力，改变机体的情绪体验和身体机能状态[3]。

　　适宜的音乐刺激可以改善动物的不良情绪，提高其学习和记忆能力，并能增强动物的免疫功能等，这些影响与音乐对人的作用非常相似。由此可见，动物完全可以用作音乐治疗效应研究的受试对象，通过动物实验这一新途径，更加深入地探索音乐疗法的作用机理[4]。王增贤等[5]发现，在播放小提琴协奏曲—梁山伯与祝英台(55～65?dB)时大鼠比较安静，并聚集在一起，因此本实验选取此曲。

　　本实验在参考了大量慢性不可预见性应激大鼠的制作方法的基础上构建了心理应激兔模型[69]，观察了长期慢性不可预见性应激对实验兔血脂水平的影响，以及音乐疗法对其血脂水平和血管壁脂质沉积的影响。结果显示，与正常对照组相比，心理应激组实验兔的血脂水平明显升高;与心理应激组相比，心理应激加音乐组血脂水平明显降低，脂质沉积量明显减少，而音乐组与对照组之间血脂水平和血管壁脂质沉积量无统计学差异，表明音乐本身对正常机体的血脂水平和血管壁脂质沉积量没有明显影响，但可以显著缓解长期慢性心理应激所导致的血脂代谢紊乱，减少血管壁脂质沉积。

　　音乐作用于听力系统，首先引起神经内分泌的改变，继而引起机体一系列的改变。因此，我们推测音乐的降脂作用可能与某些神经内分泌因子有关。NPY是一种由36个氨基酸组成的多肽，与机体的心理应激反应密切相关，被认为是一种“应激分子”，在精神压力和应激状态下释放[10]。同时，NPY在脂质代谢调节过程中也具有关键性作用。研究表明[11]，NPY血浆浓度变化与LDL血浆水平之间存在着正相关关系。本研究结果证实，NPY与血脂浓度和应激程度均呈正相关关系，与文献报道相一致，且音乐加应激组的NPY浓度和血脂浓度均明显低于应激组。据此推测音乐对长期慢性心理应激兔的降脂作用可能与抑制NPY的释放有关，但其具体的机制及是否与其他的神经内分泌因子有关还有待进一步研究。

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