HPV各亚型在新疆各地区维吾尔族宫颈癌患者中的分布研究

　　【关键词】 HPV亚型 新疆 维吾尔族 宫颈癌 分布研究

　　Study on distribution of HPV subtypes in Uygur women with

　　cervical cancer from every region of Xinjiang Guzalnur·Abliz, Patima·Mijit,　LI Tingfang, et al

　　(Department of Gynecology, Affiliated Tumor Hospital, Xinjiang Medical University,

　　Urumqi 830011, China)Abstract: Objective: Investigate the distribution of Human papilloma virus (HPV) subtypes in the Xinjiang Uygur cervical cancer patients, and the relation between HPV infection with clinical stages, pathological types and cell differentiations degree, provide theory bases for research on Xinjiang HPV vaccine. Method: To detect the 21 subtypes of HPV from 350 cases of cervical carcinomas， by using flowthrough hybridization and gene chip technology. Results: (1) 291 cases were detected to be HPV positive in 350 cases Xinjiang Uygur cervical cancer patients, HPVpositive rate was 83.14%, the order of frequency of HPV subtypes in Xinjiang Uygur cervical cancer are: HPV16, 18, 68, 45, 58, 39, 31, 56, 59, 53, 6， other subtypes are not detected out. (2) There was no statistical differences between southern and else region in Xinjiang of the positive rate of HPV and HPV16. (3) HPV positive rate were no statistical differences in clinical stages Ⅰ～Ⅱ and Ⅲ～Ⅳ (P>0.05); there has no statistical differences between differentiations degree (P>0.05). Squamous cancer, other pathological types has statistical differences with adenocarcinoma tissue respectively (P<0.05). Conclusions: HPV positive rate were very high in Xinjiang regions, HPV16 positive rate is the highest, HPV18 follows it, and the positive rate is much lower than other reports; HPV68 and HPV45 are at the third place, this is different from HPVsubtypes distribution in other region. HPV infection was not related to the clinical stages and differentiations degree of cervical cancer, but related to the pathological types of cervical cancer.

　　Key words: human papiloma virus; cervical cancer;xinjiang; Uygur; HPV vaccine

       新疆作为宫颈癌高发区之一，维吾尔族妇女的宫颈癌患病率明显高于其他各民族，平均发病年龄为43岁[1] 。有资料统计新疆和田策勒县维吾尔族宫颈癌患病率为526/10万[2]，喀什伽师县夏普桃勒乡普查结果宫颈癌患病率为459/10万[3]。大量证据均表明HPV感染是子宫颈癌的病因,即HPV感染是子宫颈癌发生的必要条件,很多报道显示95%以上的宫颈癌组织中含有HPV DNA，其中以HPV16感染为主，次之为HPV18、45、52、58等;大部分报道中HPV16居首位，但其他类型在不同地区和不同种族的分布不同[4],并且HPV感染率与宫颈癌的高、低发区相一致。本研究旨在通过对新疆各地区350例维吾尔族宫颈癌患者中HPV各亚型分布，以及HPV与宫颈癌临床分期、病理类型、分化程度的关系的系统性研究，探讨新疆维吾尔族宫颈癌HPV各亚型的分布特点，为新疆地区HPV疫苗的研制及其应用提供理论基础。

　　1材料与方法

　　1.1临床资料选择2004年1月～2006年7月，新疆医科大学附属肿瘤医院、和田地区各县医院、喀什地区第一人民医院、喀什地区第二医院、喀什地区妇幼保健医院门诊就诊及住院患者的经病理证实的维吾尔族宫颈癌新鲜标本350例，其中喀什、和田、阿克苏三个地区共274例，乌鲁木齐、库尔勒、吐鲁番、哈密、伊犁、石河子六个地区共76例，年龄21～76岁，平均48.5岁。宫颈癌临床分期、病理组织学分级及细胞分化程度均参照FIGO 2003年的宫颈癌诊治规范标准，所有新鲜标本均于放疗或化疗之前采集，立即入液氮后，再置于-86℃冰箱内保存。

　　1.2方法人乳头状瘤病毒(HPV)基因微阵列分型检测试剂盒是以凯普医用核酸分子快速杂交仪为平台，利用导流杂交的原理，在已经固定好核酸探针的低密度基因芯片膜上，可一次性快速检测占中国人群HPV感染95%的21种HPV亚型的基因分型。此21种亚型包括13种高危亚型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68;5种低危亚型：6、11、42、43、44;3种中国人群常见亚型：53、66和CP8304型。

　　1.3统计学处理采用SPSS13.0软件进行统计处理，用χ2检验进行统计分析，检验水准α=0.05。

　　2结果

　　2.1HPV各亚型在新疆各地区宫颈癌患者中的分布维吾尔族宫颈癌患者来自于新疆各地，新鲜标本350例,其HPV总阳性率为83.14%;其中喀什82.71%(110/133)、和田82.08%(87/106)、阿克苏88.57%(31/35)、库尔勒50.0%(4/8)、乌鲁木齐81.82%(18/22)、伊犁90.48%(19/21)、吐鲁番86.67%(13/15)、哈密87.50%(7/8)、石河子100%(2/2)，各地区HPV阳性率基本上接近。HPV16无论在350例宫颈癌或291例HPV阳性的宫颈癌患者中均出现的频率最多，其次为HPV18，排在前五位的HPV亚型按其出现的频率多少排列依次为HPV16、HPV18、(HPV68及HPV45)、HPV58及HPV39;HPV68和HPV45出现的频率相同均在第三位，结果见表1和图1、2。[注明：因相关文献报道喀什、和田及阿克苏宫颈癌发病率相对较高，故作者将这三个地区与其它地区分开讨论。计算HPV出现的频率时若一例宫颈癌患者被多重感染-HPV16;18，其中的HPV16及HPV18各算一次，因此HPV感染总人数为291人(其中喀什等地区228人、其它地区63人)，但HPV在宫颈癌患者中出现总频率次数为330次(其中喀什等地区254次、其它地区76次)。因此HPV出现的频率多于HPV阳性的标本数]。表1HPV各亚型在350例宫颈癌及291例HPV阳性

　　2.2HPV各亚型在不同地区宫颈癌患者中的频率分布在喀什等地区维吾尔族宫颈癌中HPV各亚型出现的频率依次为HPV16、HPV18、HPV58、HPV68及HPV45，而在其它地区维吾尔族宫颈癌中HPV各亚型出现的频率依次为HPV16、HPV18、HPV45、HPV68及HPV39，在喀什等地区排在第三位的HPV58亚型在其它地区未检测出;前者HPV阳性率为83.21%、HPV16阳性率为75.55%，后者HPV阳性率为82.89%、HPV16阳性率为78.95%，两组HPV及HPV16阳性率差异均无统计学意义(P>0.05),见表2。表2HPV各亚型在不同地区宫颈癌患者中 的频率分布

　　2.3HPV感染与临床分期、病理类型及分化程度的关系临床分期Ⅰ～Ⅱ期及Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌HPV阳性率分别为82.08%及85.45%，两者无显著差异(P>0.05)。高分化、中分化及低分化者HPV阳性率分别为90.91%、81.85%及87.93%，三者 HPV阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。鳞癌、腺癌及其它病理类型宫颈癌HPV阳性率分别为83.78%、58.33%及100%;鳞癌及其它病理类型宫颈癌HPV阳性率明显高于腺癌，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。表3HPV感染与临床分期、病理类型及分化程度

　　3讨论

　　3.1HPV在不同种族及不同地区中的分布世界癌症组织的多中心研究提示[5-6] ，不同国家不同地区HPV感染率不同，但是与宫颈癌分布相一致。非洲东北部以及美洲中南部地区正常人群HPV 感染率要明显高于其他地区，其感染率分别为34.0%和23.5%。大部分报道提出HPV阳性率与宫颈癌高低发区相一致，如Das等[7]发现印度妇女宫颈癌中HPVDNA检出率高达98.0%，唐小丽等[8]对四川省宫颈癌高发区广元及低发区绵竹进行HPV DNA 的检测发现高发区人群HPV16及33 的阳性率为18%，低发区为3.4%，两者有显著性差异;古扎丽努尔·阿不力孜等[9]报道新疆维吾尔族宫颈癌中HPV16的阳性率高于四川西北地区汉族。本研究显示新疆各地区宫颈癌标本350例，其中HPV阳性患者291例，HPV总阳性率83.14%;有关文献报道新疆宫颈癌高发区的喀什等三个南疆地区宫颈癌患者HPV阳性率为83.21%、其中HPV16阳性率75.55%，乌鲁木齐等宫颈癌相对低发的其他地区宫颈癌阳性率82.89%、其中HPV16阳性率78.95%，南疆地区与其他地区HPV及HPV16阳性率之间无统计学差异，表明无论是宫颈癌高发区南疆或宫颈癌相对低发的乌鲁木齐等地区维吾尔族宫颈癌的发病均与HPV感染有关，并且其宫颈癌HPV感染与高低发区无关。

　　3.2HPV各亚型在宫颈癌中的分布及其排序HPV 感染亚型存在多样性和地区差异,文献报道的最常见的亚型为16、18 型[4-9]。在国际癌症研究协会(IARC) 最新报道的包括全球25 个国家的3 607例宫颈癌患者的多中心研究中显示,HPV16在所有HPV阳性的宫颈癌患者中的平均感染率为57.4%[10]; Clifford等[4]的由尼格利亚、印度、越南、泰国、韩国、哥伦比亚、阿根廷、智利、荷兰、意大利及西班牙等国家的关于HPV 亚型的研究结果提示正常人群中排在前六位的HPV DNA 亚型分别是16(4.5%),58(3.6%),18(3.1%),52(2.8%),31(2.0%)和33(2.0%);而在非洲赞比亚，HPV亚型分别为16(21.6%),18(21.6%),6(7.8%),43(5.9%),58(3.9%),35(3.9%),50(3.9%),54(3.9%),33(3.9%)和3(3.9%)[11];在中国HPV16感染率为79.6%,明显高于国外，以18亚型居第二位,58和52分别居第三和第四位[12] 。有报道[13]发现HPV52、58亚型在上海宫颈癌患者中的阳性率为42.5%,甚至高于16、18亚型，中国南方地区52、58亚型的感染率较北方高,在台湾除HPV16、18外,31、33、35的感染率较高,说明在中国人中16、18、52、58、31、33最常见亚型。在本研究350例维吾尔族宫颈癌中，21种HPV亚型中被检测出11种，HPV各亚型在新疆维吾尔族HPV阳性的宫颈癌组织中出现的频率排序为：HPV16(91.75%)、18(6.19%)、68(3.44%)、45(3.44%)、58(3.09%)、39(1.72%)、31(1.37%)、56(1.37%)、59(0.34%)、53(0.34%)、6(0.34%)，HPV18虽然在第二位但其阳性率低于文献报道，可能与维吾尔族宫颈癌的病理类型中腺癌的比例低及本组资料中宫颈腺癌比例低有关[1，14];HPV各亚型的分布也有中国人的特点，也有本民族及新疆地区各自的特点，即HPV16占主导地位、其在所有HPV感染中的比例高于其他地区及民族，HPV18位置排在第二,但占的比例低于其他文献报道，HPV68在其他报道中排在第五位之后、在本组资料中排在第三、HPV68可能是新疆维吾尔族宫颈癌中除了HPV16及HPV18以外较常见的类型，HPV45和HPV58的接近中国人宫颈癌HPV分布特点。

　　3.3HPV感染与宫颈癌的临床分期、病理类型及组织分化程度的关系关于HPV亚型及宫颈癌病理类型的关系，谭兵兵等[14]的研究报道：宫颈鳞癌中HPV16的阳性率为68.52%,HPV18阳性率7.87%，而在宫颈腺癌组织中HPV16阳性率为9.76%,HPV18的阳性率56.09%，提示不同组织病理学类型的宫颈癌中，HPV16及HPV18的感染率明显不同。宫颈鳞癌中HPV16的感染较高，HPV18的感染率较低，宫颈腺癌中，HPV18的感染较高，HPV16的感染率较低，出现这种差异的原因尚不清楚，是否HPV16易感染趋向鳞状上皮分化的细胞，还是由于HPV16感染后的细胞趋向于鳞状上皮的分化，HPV18感染后的细胞趋向于腺上皮的分化有待进一步研究。Clifford等[4]收集85项研究中10 058例浸润性宫颈癌患者，其中鳞状细胞癌8 550例，腺癌和腺鳞癌1 508例，对所有患者进行HPV DNA检测，鳞状细胞癌中HPV检出率为87.3%。本研究中，鳞癌及其它病理类型宫颈癌分别与腺癌的HPV阳性率有显著差异(P<0.05)，与文献报道有差异[14];各临床分期宫颈癌HPV阳性率无显著性差异(P>0.05);肿瘤分化与HPV阳性率无关(P>0.05);可以推出HPV感染与维吾尔族宫颈癌的临床分期、分化程度无关、与病理类型有一定的关系。

　　3.4HPV分子流行病学研究在HPV疫苗研究及应用中的意义从致病机理上说，宫颈癌是一种性传播疾病，通过阻断HPV的传播可预防宫颈癌的发生。2004年世界卫生组织(WHO)公布宫颈癌是唯一的可望消灭的癌症，因为已确定其主要和必要的病因就是HPV感染，因此通过HPV的干预，可以预防宫颈癌。最近美国FDA已批准了默沙东公司生产的Gardasil疫苗，该疫苗可以为9～26岁的女孩接种，该疫苗可以保护女孩不感染4种类型的HPV。既然宫颈癌疫苗已诞生并已用于人群，但很重要的一个问题在于不管在哪个国家，研发和投放疫苗之前都必须先了解HPV流行的状况，才能做到有的放矢[15]。本研究显示在新疆维吾尔族宫颈癌HPV及各亚型的分布与其它国家及国内其它地区其它民族相比有较多不同之处。无论是宫颈癌相对高发的和田、喀什及阿克苏等地区还是在乌鲁木齐等其他地区，HPV阳性率均较高，高于其它地区相关文献报道。HPV各亚型的分布情况来看，HPV16在各地区均排在首位，与国内外其他种族及民族相比，其HPV16在宫颈癌及HPV阳性患者中出现的频率高，HPV18虽然在第二位，但其频率明显低于文献报道，在欧洲国家及国内排序第二的HPV58型在喀什等地区宫颈癌中位于第三位，之后的HPV68及HPV45与国内各亚型的分布状况不太一样。HPV各亚型的分布及频率体现了维吾尔族HPV感染类型的独特性。HPV各亚型在新疆维吾尔族宫颈癌中的分布情况的特点，在疫苗研究及治疗中有指导作用。因此，在新疆了解HPV分子流行情况的研究在宫颈癌疫苗的研究及在将来本地区疫苗的应用中具有重大意义。

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