地黄抗疲汤对小鼠抗疲劳作用的实验研究

　　【摘要】 目的 研究地黄抗疲汤对小鼠的抗疲劳作用。方法 地黄抗疲汤组方药材经提取、浓缩至适当浓度后，对小鼠进行转棒实验和负重游泳实验。结果 与阴性组比较,转棒实验中给药组小鼠的在棒时间明显延长，游泳实验中给药组的游泳时间延长，游泳后高剂量给药组的血尿素氮降低。结论 地黄抗疲汤对小鼠具有明显的抗疲劳效果，值得进一步研究和开发。

　　【关键词】 地黄抗疲汤;抗疲劳;转棒;负重游泳;尿素氮

　　Study on fatigue resisting effect of Dihuangkangpitang in ratsZHANG Lin, WEI Jianyi, HAN Degang,TANG Zhihua,DING Jiewei,MA Youzheng

　　(1.Dept. of Pharmacy, Shaoxing People' Hospital, Shaoxing, Zhejiang Province 312000;

　　2. Disease Control Center of Laixi City, Shandong Province 266600)

　　Abstract:Objective: To study the fatigue resisting effect of Dihuangkangpitang in rats. Methods: The rats were fed for two weeks with Dihuangkangpitang extracted and properly concentrated, and then rotatingstick and loaded swimming experiment were performed. Results: In comparison with the negative team, MAT(medication administration team) extended markedly retention time on rotating stick in rats and swimming time, too. Blood BUN also decreased in high dose MAT after 30min' swimming. Conclusion: Dihuangkangpitang has notable fatigueresisting effects in rats and is valuable for further research and development.

　　Key words:Dihuangkangpitang; fatigueresisting; rotatingstick; loaded swimming; BUN

　　疲劳是机体生理过程不能维持其机能的特定水平、不能维持预定的运动强度的一种生理或病理现象，整体性疲劳是多种致疲劳因素综合的产物[13]。疲劳如果得不到及时消除,体力恢复不充分,势必影响正常的生活和工作,过度疲劳,还会影响身体健康,祖国医学对疲劳的缓解和治疗有独到之处。

　　地黄抗疲汤主以黄芪补气扶阳;辅以熟地、黄精等养血滋阴;佐使砂仁行气化湿。在我院已用于缓解肿瘤相关性疲劳[4]、运动性疲劳[5]和治疗慢性疲劳综合征[6]。本研究对该药的抗疲劳作用进行了初步实验研究，观察了地黄抗疲汤对小鼠转棒、负重游泳和游泳后血尿素氮的影响。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 地黄抗疲汤 熟地黄等六味中药分别加12、10、10倍水煎煮3次，每次1小时，收集3次滤液合并后浓缩至1∶1(g∶ml)比例，置于冰箱(2～8℃)备用。棕褐色液体，每毫升相当于生药1 g，批号：20061208。

　　1.1.2 人参提取液 人参饮片浸泡12小时后分别加12、10、10倍水隔水煎煮，煎煮时间分别为2、2、1小时，合并3次滤液，浓缩至1∶2(g∶ml)比例后置冰箱(2～8 ℃)中备用。棕黄色液体，每毫升相当于人参生药0.5 g，批号：20061215。

　　1.1.3 蒸馏水 用ROMB20D型反渗透高纯水机制备。

　　1.1.4 实验动物 健康ICR小鼠，清洁级，150只，雌雄兼用，体重18～22 g。由浙江省实验动物中心提供。饲养于全封闭清洁级动物房内。饲全价营养颗粒饲料，由浙江省实验动物中心饲料生产基地供应。饮水为自来水用净水器过滤后自由饮用。动物质量合格证：SCXK(浙)20030001。

　　1.1.5 实验仪器 YLS4C转棒式疲劳仪：山东省医学科学院设备站制造;游泳箱：(规格： 60 cm×50 cm×40 cm)。

　　1.2 方法

　　1.2.1 动物分组及给药

　　实验分为5组，其中给药组又分为地黄抗疲汤高中低三个剂量组，剂量分别为50.0 g生药/kg·d-1、25.0 g生药/kg·d-1和12.5 g生药/kg·d-1，阳性对照组给予人参提取液(25.0 g生药/kg·d-1)，阴性对照组给予蒸馏水(25.0 ml/kg·d-1)

　　以上剂量临用时分别将原液用蒸馏水稀释成不同浓度、同等容量溶液，供小鼠灌胃用。各组给药容量相同。

　　1.2.2 转棒实验

　　取雄性ICR小鼠，将YLS4C转棒式疲劳仪的转速调整至40转/分，同步将5只小鼠放在转棒上，挑选能在转棒上停留30 min不落下的小鼠50只。

　　将筛选出的50只合格小鼠随机分为5组，每组10只。各组分别灌胃给予以上各剂量的地黄抗疲汤、人参提取液和蒸馏水,给药容量均为0.5 ml/20g体重。每天上下午各给药1次，连续14 d。每隔1天称小鼠体重，并按体重调整给药量。末次给药后1 h，将各组小鼠放置在转速为40转/分转棒上，记录小鼠在转棒上的停留时间。若小鼠在1 min内落棒，则该组小鼠需要立刻重新进行实验。

　　1.2.3 负重游泳实验

　　取雄性ICR小鼠，置于水温25±1 ℃、水深约30 cm的游泳箱中，选取会游泳且游泳姿势正确的小鼠50只。

　　小鼠分组及喂养方法同转棒实验。末次给药1 h后，在鼠尾根部负荷5%体重的铅皮，置于游泳箱中游泳，至小鼠沉入水底6 s后不再浮起作为力竭死亡标准，记录自游泳开始至死亡时间，作为小鼠负重游泳时间。

　　1.2.4 游泳后血尿素氮测定

　　取雄性ICR小鼠，置于水温为30 ℃，水深约30 cm的游泳箱中，选取会游泳且游泳姿势正确、BUN含量正常的小鼠50只。

　　小鼠分组及喂养方法同转棒实验。末次给药30 min后，再次将各组小鼠置于水温为30 ℃，水深约30 cm的游泳箱中，游泳时间30 min，取出擦干，立即眼眶静脉丛采血0.5 ml左右，离心取血浆，检测血BUN含量。

　　1.2.5 统计方法 用NDST(新药统计软件)相应的统计方法对各实验组进行统计分析。组间比较采用方差分析。

　　2 结 果

　　地黄抗疲汤对小鼠转棒实验，游泳实验及游泳后BUN含量的影响 结果见表1。

　　表1中可见：转棒实验高、中剂量给药组较蒸馏水组在棒时间明显延长;而游泳实验中三个剂量给药组都较蒸馏水组时间有所延长，中低给药组更明显一些。游泳后各组血BUN比较给药组BUN含量较蒸馏水组有所下降，但是没有统计学意义。表1 地黄抗疲汤对小鼠转棒实验，游泳实验及游泳后BUN含量的影响注：与蒸馏水组比较：**P<0.01，*P<0.05

　　3 讨 论

　　疲劳最主要的表现是运动耐力的下降，运动耐力是反映机体疲劳最直接和客观的指标，小鼠游泳实验和转棒实验是一种强迫性全身消耗性运动, 剧烈的运动消耗大量的能量和氧气,运动时间的长短，是机体生理活力的综合反映，它是衡量疲劳的一个指标，间接反映了机体组织、脏器的健康状况和疲劳程度。地黄抗疲汤根据补益和调理的治疗原则，以整体观的思路设立处方，能明显延长小鼠游泳时间和转棒时间，提示其可提高机体运动耐力，延迟疲劳出现的时间。

　　转棒实验也提示地黄抗疲汤能提高小鼠的平衡功能，可能对中枢神经系统有一定影响。

　　BUN与机体运动适应能力、疲劳程度密切相关，机体血尿素氮含量随运动负荷的增加而增加，身体对负荷的适应性越差，则产生的尿素氮就越多，因此可以作为评定价疲劳的指标。高剂量组小鼠血清尿素氮值较蒸馏水组低，虽然没有统计学意义，但是推测可能地黄抗疲汤与加快小鼠从肾脏中消除BUN的能力有关;阳性组消除尿素氮的效果不明显，可能是实验规定的时间较短，也与实验动物的数量较少有一定关系。

　　本实验结果证明，地黄抗疲汤能减轻运动性疲劳，延长运动时间，延缓疲劳出现的时间，实验结果可为抗疲劳中药的研究和开发提供初步实验依据。

　　【参考文献】

　　[1] 乔秀红.疲劳产生的原因及抗疲劳食品研究[J].山西师大体育学院学报，2000，(15)4：7374.

　　[2] KA Jung, D Han, EK Kwon, et al. Antifatigue effect of Rubus coreanus Miquel extract in mice[J]. J Med Food, 2007,10(4): 68993.

　　[3] JH Koh, KM Kim, JM Kim, et al. Antifatigue and antistress effect of the hotwater fraction from mycelia of Cordyceps sinensis[J]. Biol Pharm Bull, 2003, 26(5): 6914.

　　[4] G. Prue J, Rankin J, Allen, et al. Cancerrelated fatigue: A critical appraisal[J]. Eur J Cancer, 2006, 42(7): 84663.

　　[5] 齐雷涛，牛泽亮，丁涛. 运动性疲劳及消除[J].中国康复理论与实践，2007，13(3)：298299.

　　[6] YaoHaur Kuo,WeiJern Tsai, SoyHwee Loke，et al. Astragalus membranaceus flavonoids (AMF) ameliorate chronic fatigue syndrome induced by food intake restriction plus forced swimming[J]. J Ethnopharmacol, 2009, 122(1): 2834.