慢性前列腺炎及小檗碱免疫机制的研究进展

　作者：赵晓峰，何学军    作者单位：汕头大学医学院第一附属医院泌尿外科，广东汕头515041

　【摘要】  近年来，对慢性前列腺炎(CP)发病机制的研究焦点已转移至炎症反应应答的免疫调节机制方面。小檗碱(Ber)具有较强的免疫药理作用，对CP具有一定疗效。本文就国内、外对CP免疫学病因、Ber免疫作用机制、免疫药理作用及其对CP的治疗作用作一综述。

　【关键词】  慢性前列腺炎；小檗碱；免疫机制

　慢性前列腺炎(CP)是男性多发病、常见病。近年来对其发病机制的研究已从定义细胞成分转移到调控炎症反应的介质上，并着重于炎症反应应答的免疫调节机制［1］。小檗碱(Ber)是从黄连、黄柏等植物中提取的异喹啉类生物碱,具有广泛的药用价值。文献表明，Ber具有较强的免疫药理作用,对CP具有一定疗效，但对治疗CP的作用机制研究报道较少。本文就国内、外对CP免疫学病因、Ber免疫作用机制、免疫药理作用及其对CP的治疗作用作一综述。

    1  CP免疫学病因机制

    CP的免疫学病因和发病机制较复杂,前列腺炎患者的前列腺液中常常可以出现白细胞介素IL_1β、肿瘤坏死因子(TNF)_α、IL_6、IL_8、IL_10等细胞因子水平的变化,且其表达与症状及治疗反应均有一定的相关性［2_3］。目前认为，前列腺炎症是以细胞因子为中介产生的连锁反应。炎症在始动因素作用下产生促炎性细胞因子，这些细胞因子可以增加趋化因子的表达，而表达产物通过各自的机制对机体组织造成损伤，而促炎症因子、抗炎性细胞因子、细胞因子拮抗剂等之间的平衡将影响炎症过程及转归［1］。

    11抗原性物质刺激

    外界某些抗原性物质进入人体后，在宿主体内引起免疫应答，从而可致变态反应性前列腺炎的发生，这种炎症实际上是一种过敏性反应。多数学者认为，CP的主要发病机制不是外界来源抗原性物质的刺激，而是与自身免疫性过程有关。PONNIAH等［4］发现一些有临床症状的CP患者可以产生针对前列腺特异抗原(PSA)的增殖性CD4 T淋巴细胞反应，并认为PSA是诱发CP的抗原性物质。此外，精浆也可以用于刺激机体的自身免疫反应。PSA被T细胞识别表明免疫反应参与了CP的发病机制。

    12异常的免疫应答反应

    121体液免疫急性前列腺炎患者可以表现出独特的局部性抗体反应，主要为分泌型IgA(SIgA)。在前列腺液中的IgA不依赖于血清反应，对感染性病原体具有特异性的对抗作用。前列腺液中SIgA升高可作为Ⅱ型前列腺炎的诊断依据之一。在CP中，尽管前列腺液抗原特异性IgA、IgM和IgG水平都升高，但血清中的免疫球蛋白均无升高。在治愈的慢性细菌性前列腺炎患者中，各种免疫球蛋白开始降至正常前，前列腺液中IgA可维持近2年，IgG近6个月。

    免疫抑制因子(IAP)参与体液免疫反应的全过程，起到调节体液免疫反应的作用。研究发现，CP患者前列腺液中IAP明显减低，而免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及SIgA浓度明显增高，后者能阻止大肠埃希菌在黏膜表面粘附，活化补体系统，提示CP的发生与免疫增强有一定关系。

    122细胞免疫研究发现，细胞免疫反应均参与了CP的免疫反应过程，而这种作用是细胞因子为中介的连锁反应，炎症反应在始动因素(感染、损伤、免疫等)作用下，产生炎症促进性细胞因子(IL_1β、TNF_α等),而这些因子可增强趋化因子(IL_8、上皮中性粒细胞活化肽78等)、环氧合酶(COX)_2及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的细胞粘附分子的表达，引起全身性的炎症反应，通过各自的机制对机体造成损伤并导致疼痛。细胞因子基因表达水平的复杂变化过程可能在CP发病机制中起重要作用，炎症促进性细胞因子和抗炎症性因子的动态平衡将决定着炎症反应的过程和转归。细胞因子水平与临床症状及治疗反应均有一定的相关性，并为免疫治疗CP奠定了基础［1］。

    在生理条件下，Th1/Th2处于相对平衡状态，在调节机体的免疫应答起重要作用。刘海红等［5］研究发现，CP患者Th1型反应模式占优势状态，Th1/Th2平衡失调，平稳向Th1方向变化，提示Th1细胞在CP的病理发生中可能有重要意义。

    2  Ber免疫作用机制

    21Ber能够抑制WBC与内皮细胞的粘附

    WBC的迁移是炎症反应的重要环节，B细胞与嗜中性粒细胞、淋巴细胞的粘附抑制其向炎症部位迁移,减少炎性细胞浸润,减轻炎症反应。

    郝钰等［6］研究以IL_1、TNF诱导人多形核白细胞(PMN)与内皮细胞粘附增加,模拟体内炎症反应状态,结果显示,Ber能抑制IL_1、TNF激活的内皮细胞与PMN的粘附,亦可抑制TNF激活的PMN与血管内皮细胞的粘附,提示Ber可通过抑制炎症反应时PMN与内皮细胞的粘附而抑制炎症反应;并检测了在WBC与内皮细胞稳定粘附中起主要作用的粘附分子ICAM_1和CD_18的表达,结果表明，Ber可下调由IL_1、TNF诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表面ICAM_1的高表达,同时可减少TNF诱导的PMNCD_18表达增多,与粘附实验结果相符,说明抑制内皮细胞ICAM_1及PMNCD_18的表达是Ber抑制PMN与内皮细胞粘附的分子机制之一。

    研究发现，Ber对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠DTH具有明显的抑制作用,其发挥抗炎作用的机制之一可能是降低了小鼠T细胞与细胞外基质(ECM)的粘附能力［7］。郝钰等［8］以Ber处理人淋巴细胞或HUVEC后，用蛋白染料染色法研究对淋巴细胞与内皮细胞粘附的作用，用细胞ELISA、免疫细胞化学染色法研究对细胞表面粘附分子表达的影响。结果Ber能抑制静息的及被IL_1、TNF激活的内皮细胞与淋巴细胞间的粘附，其主要分子机制为下调内皮细胞表面粘附分子ICAM_1的表达；Ber能抑制IL_l激活的淋巴细胞与内皮细胞的粘附，对淋巴细胞表面粘附分子CD18的表达无影响。说明Ber抑制细胞表面粘附分子的表达而抑制淋巴细胞与内皮细胞的粘附。

   22Ber对细胞因子免疫抑制作用

    细胞因子在炎症的发生、发展和转归过程中具有极其重要的作用,通过抑制促炎细胞因子的产生可减轻炎症反应的病理表现。研究证实，Ber对多种促炎细胞因子的产生和表达具有抑制作用。

    Ber可以降低TNF_α、IL_6、IFN_γ、NO_、C反应蛋白、结合珠蛋白等的水平,增加IL_10等抗炎细胞因子的表达,达到减少内毒素血症等组织损伤的作用［9］。

    LEE等［10］研究了13代烷基Ber对脂多糖刺激巨噬细胞的COX_Ⅱ,TNF_α以及IL_12表达的影响。结果显示,13代烷基Ber能够降低LPS刺激巨噬细胞的亚硝酸盐的产生；前列腺素E2有明显的下降,IL_12产生明显上升；但是iNOS,COX_Ⅱ和TNF_α没有太大变化。这些充分说明,Ber能够介导IL_12的产生,从而产生抗炎作用。

    以DNFB小鼠模型观察Ber对小鼠迟发性超敏反应(DTH)及其体内几种重要细胞因子的影响。采用1％ DNFB腹部致敏、耳郭发敏的方法建立DTH小鼠模型，以巨噬细胞(MΦ)亚硝基释放法测定血清IFN_γ水平，胸腺细胞法检测IL_1水平，丝裂原激活的淋巴母细胞法检测IL_2水平，L929细胞结晶紫染色法测定TNF_α水平。结果发现，Ber可抑制DNFB诱导的小鼠DTH，降低其血清IFN_γ水平,抑制其腹腔MΦ产生IL_1及TNF_α，抑制其脾细胞产生IL_2。这表明Ber有抑制小鼠DTH的作用，从而抑制免疫反应，减轻炎症损伤［11］。

    LU等［12］研究发现灌服Ber　15?mg/mL对DNFB所致的小鼠DTH有抑制作用,其机制可能是抑制了IFN_γ、IL_1、TNF_α、IL_2等因子的产生和分泌,从而抑制免疫反应,能够抑制内皮炎症损伤。何贤辉等［13］研究表明,Ber不但能抑制淋巴细胞的增殖与活化,也可抑制INF_γ、TNF_α和IL_2等细胞因子的产生。CUI等［14］研究发现，Ber能够剂量依赖地抑制IL_8和单核细胞趋化蛋白1的表达。

    另外,Ber可以通过抑制酶的表达而起抗炎作用,比如Ber可以增加内皮细胞性一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达和抑制iNOSmRNA的表达,对乙醇诱导的鼠胃溃疡起到保护作用［15］。

    3   Ber免疫药理作用治疗CP的机制

    随着对CP发病过程中的免疫学指标改变的深入研究，逐步发现细胞免疫和体液免疫反应均参与了CP的免疫反应过程，免疫异常在CP(尤其是难治性CP)发病中具有重要作用。细菌性前列腺炎患者前列腺液中的细菌在细胞内外产生的粘性物质，埋藏在前列腺组织内，其抗吞噬和抗趋化作用必然使白细胞浸润和淋巴细胞增殖受到影响，使前列腺感染难治而易复发。

    Ber对免疫系统的影响较为复杂,Ber通过抑制WBC与内皮细胞的粘附及炎症细胞因子，具有抗炎、抑制细胞免疫和体液免疫功能的作用。同时，通过Ber的免疫调理，可以提高CP患者机体全身和局部的免疫功能、提高综合疗法的治疗效果、缩短治疗时间、防止复发。

    刘吉娥等［16］研究Ber离子透入联合超短波治疗CP，观察治疗前、后的症状、体征及前列腺液中白细胞计数等，总有效率955%，疗效确切。

    但是，国内、外对Ber免疫药理作用治疗CP的研究报道较少，而祖国中药(如黄连、黄柏的有效成分为Ber)对CP的治疗，经临床试验证明安全可靠。近年来对前列安栓治疗CP的临床研究较多，Ber是前列安栓中主要药物黄柏的有效成分。容永欢［17］采用高效液相色谱(HPLC)法测定4批前列安栓(2?g/粒)中盐酸Ber浓度分别为223、202、198、213?mg/粒。经大肠杆菌制作大鼠细菌性前列腺炎模型、角叉菜胶制作大鼠CP模型及病理检查、丙酸睾丸素制作大鼠前列腺增生模型等药理实验，结果表明前列安栓对大鼠细菌性及非细菌性前列腺炎有明显治疗作用；药理实验结果表明前列安栓能明显提高热板小鼠的痛阈值、减少醋酸致痛小鼠的扭体次数、抑制二甲苯所致小鼠耳郭肿胀、抑制慢性肉芽肿增生；体外抗菌试验表明前列安栓对多种细菌有不同程度的抑菌作用；能明显增加小鼠网状内皮系统吞噬功能，提示具有提高非特异性免疫功能的作用。研究表明，前列安栓具有抑制COX转录活性,阻断炎性介质形成,减少组织间炎性细胞浸润,能消退炎症,减轻尿道阻力,从而缓解CP症状［1］。先后在上海(2001年)、北京(2002年)完成的前列安栓多中心、随机对照临床试验结果显示，前列安栓治疗CP的有效率分别为686%和719%，证实了前列安栓治疗CP的有效性［18_19］。

    4展望

    尽管Ber对CP的治疗作用已得到国内、外男科学界的认同，但目前相关的临床报道多为中药复方制剂，缺乏较系统深入的纯Ber制剂治疗CP的实验、理论与临床研究，重复试验可行性差。未来应在深化对CP的病因、发病机制研究(如自身免疫机制及细胞因子在CP发病中所起的作用)的基础上，重点研究Ber对CP中炎症细胞介导炎症系统细胞凋亡的调控作用，对炎症反应信号受炎症反应递质(如炎症因子、粘附分子、趋化因子等)的调控作用，建立更为理想的动物实验模型，拓展研究范围，开展大样本、大规模的临床试验，开发出能缩短治疗CP的疗程、减少复发率，进入国际市场的有效和安全制剂。

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