基于抗炎、胃肠运动实验探讨布渣叶清热消滞的功效

　　布渣叶为椴树科植物破布叶Microcos panicuIata L.的干燥叶[1]，具有清热消滞，利湿退黄之功效，用于感冒，湿热食滞之脘腹痛，食少泄泻，湿热黄疸。然而，到目前为止，对于布渣叶的有关研究只是进行了一些初步工作，其研究还处于初步探索阶段，布渣叶各方面的研究工作还很不完善，对于布渣叶的毒理、药理与机理研究则处于空白。为此，通过建立药理实验模型，深入研究布渣叶的清热消滞的药理活性，为布渣叶的新产品开发提供药理基础，为临床应用提供更全面参考，填补布渣叶在药理研究方面的空白，使布渣叶这一广东凉茶瑰宝得到更好、更广泛的应用。
　　
　　1 实验材料
　　
　　1.1 药物及试剂
　　布渣叶药材采摘于广东湛江，经广州中医药大学中药鉴定学教研室李薇教授鉴定为真品布渣叶Microcos paniculata Linn；健胃消食片：修正药业集团股份有限公司，批号：20073298；醋酸泼尼松片：上海信谊药业有限公司，批号050603；双黄连胶囊：河南天方药业有限公司，0.4 g/粒，批号01l004；醋酸、二甲苯（市售分析纯）；其余试剂均为市售分析纯。
　　
　　1.2 动物
　　昆明种小鼠，雄性，体重18～22g，SPF 级，由广州中医药大学实验动物中心提供，动物合格证号：2010C108。
　　
　　1.3 实验仪器
　　紫外可见分光光度计（上海第三分析仪器厂）；1／10 万分析天平（北京赛多利斯仪器）；LD42A 离心机（北京）；FA2004 电子天平；直径6 mm 的打孔器；灌胃针、注射器、量筒、剪刀、镊子、尺子、止血钳等。
　　
　　2 实验方法
　　
　　2.1 布渣叶水提液的制备
　　按照《中国药典》中规定的操作方法，取适量布渣叶样品，粉碎，水煎2 次合并药液，过滤浓缩，给药时以蒸馏水稀释至所需浓度。
　　
　　2.2 统计学处理方法
　　实验数据以均数±标准差表示，采用SPSS 10.0 软件进行统计学处理。
　　
　　2.3 布渣叶水提液的抗炎实验
　　2.3.1 布渣叶水提液对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
　　取健康的雄性小鼠50 只，将其随机分为5 组，每组10 只，分别为模型对照组，布渣叶水提液小剂量组（0.94 生药g /kg，相当于人临床用量的2 倍)，中剂量组（1.88g 生药/kg），大剂量组（3.76g 生药/kg）及阳性药醋酸泼尼松组(8.9mg/kg，相当于人临床用量的10 倍)，连续ig7d，每日1 次，容量为20 ml/kg，模型对照组给予等量蒸馏水，末次药后30 min，分别在小鼠右耳两面涂以二甲苯0.05 ml/只，左耳作对照，15min 后处死动物，用直径6 mm的打孔器将双耳同部位冲下，用FA2004 电子天平称重，以左、右耳片重量之差为肿胀度，计算各组肿胀度。
　　2.3.2 布渣叶水提液对醋酸引起小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
　　取健康小鼠 50 只，体重20～22g，雌雄各半，随机分为5 组。空白对照组：蒸馏水10ml/kg；阳性药双黄连胶囊组（0.88 g／kgd）；布渣叶水提液小剂量组（5g 生药/kgd），中剂量组（10g 生药/kgd），大剂量组(20g 生药/kgd)。灌胃给药，每天1 次，连续7 d，末次给药30 min 后，尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水，腹腔注射0.6%醋酸盐水0.2ml/只。20 min后将小鼠颈椎脱臼处死，剪开腹腔皮肤肌肉，用6ml 生理盐水数次洗涤腹腔，吸管吸出洗涤液，合并后加入生理盐水至10ml，3000 rpm 离心15min，取上清液与分光光度计590 nm 波长处比色测吸收度(A 值)。结果进行组间比较t 检验[2]。
　　
　　2.4 布渣叶水提液的胃肠运动实验
　　2.4.1 布渣叶水提液对小鼠肠推进作用的影响
　　取健康小鼠 50 只，体重20～22g，雌雄各半。随机分为5 组，每组10 只，雌雄分笼饲养。喂食常规颗粒饲料，自由饮水。各组动物实验前3d 开始灌胃给药，剂量分别为布渣叶水提液小剂量组（5g 生药/kgd），中剂量组（10g 生药/kgd），大剂量组(20g 生药/kgd),阳性药物组健胃消食片2g/kg,空白对照组给同剂量自来水。每天按照剂量灌胃1 次，连续3d，末次给药后禁食24h，结束后经灌胃墨水0.2ml，然后再灌胃给予受试药物，10min 后，脱椎处死动物，剖开腹腔，立即剖取贲门至直肠末端完整肠体，平铺于实验台上，测量全长和墨水前沿到贲门的距离，计算墨水推进百分率(墨水前沿到贲门的距离占完整肠体全长的百分比)[3]。
　　
　　3 结果
　　
　　3.1 布渣叶水提液对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
　　布渣叶水提液高，中，低3 剂量及醋酸泼尼松组小鼠耳肿胀度均较模型组小鼠轻（P<0.05或P<0.01），显示出较好的抗炎作用。
　　
　　3.2 布渣叶水提液对醋酸引起小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
　　布渣叶水提液高、中、低3 剂量和双黄连对醋酸引起小鼠腹腔毛细血管通透性增加有明显抑制作用，与空白对照组比较有明显统计学差异。
　　
　　3.3 布渣叶水提液对小鼠肠推进作用的影响
　　与空白组比较，只有阳性对照组对墨水推进率差异显著（P<0.05），布渣叶水提液3 个剂量组对墨水推进率均无显著性差异，虽然布渣叶高、中剂量组对墨水推进率有提高的趋势，但无统计学意义（P>0.05）。
　　
　　4 讨论
　　
　　布渣叶为岭南习用草药，民间常用布渣叶煎茶作夏季饮料，有解渴、开胃作用，常用于治疗感冒、咽喉痛、食滞腹胀、黄疸、蜈蚣咬伤等[4] 。目前应用布渣叶为主药开发的制剂[5]如胃肠宁片和胃肠宁颗粒剂，都具有清热祛湿、健胃止泻作用，用于急性胃肠炎、小儿消化不良。为更好印证其临床效果，本文采用小鼠小肠推进运动实验，观察布渣叶水提物对胃肠功能的药理作用。同时，为验证布渣叶清热功效，本文采用二甲苯致小鼠耳肿胀的影响实验和醋酸引起小鼠腹腔毛细血管通透性的影响实验，观察布渣叶水提物的抗炎作用。
　　现代研究表明，布渣叶全草中可能含有黄酮类、生物碱、三萜类、甾体、有机酸、氨基酸、蒽醌、强心苷等成分[6]，并有降血脂、抗衰老及杀虫作用[7]。本文实验为进一步对布渣叶化学成分及药理活性进行深入研究提供了实验依据，并为布渣叶的新产品开发和临床应用提供更全面的参考。
　[参考文献]
　　[1].稽含编．生草药性备要．中国医药科技出版社．1999：1083．
　　[2].刘亚欧，白筱璐，余悦，等．柴黄制剂的解热抗炎作用研究[J]．中药药理与临床，2008，24(2)：22．．57．
　　[3].邢建峰，封卫毅等．小鼠胃排空及小肠推进实验方法的探讨．北京中医药大学学报，2003，26(4)，50～52．
　　[4].江苏新医学院编．中药大词典(下册)．上海：上海科技出版社，1986：1824．
　　[5].曾聪彦，吴惠妃等．布渣叶化学成分定性鉴别的实验研究．世界中西医结合杂志，2009，4(3)：175～176.
　　[6].曾聪彦，吴惠妃等．布渣叶化学成分定性鉴别的实验研究．世界中西医结合杂志，2009，4(3)：175～176.
　　[7]. 田索英，曾聪彦等．布渣叶的化学成分、药理作用与临床研究进展．亚太传统医药，2009，5(1)：134～136.