探讨透骨草化学成分的分析

　　0 引言
　　
　　透骨草又名老婆子针线，为透骨草科植物透骨草(Phryma leptostachya L.var.asiatica hara)的全草或根,性凉,味苦,归心经.主要功效：解毒清热，治黄水疮，疥疮及虫疮[1]。根含木脂体成分透骨草灵-Ⅱ及有杀虫作用的乙酸透骨草醇酯等[2].此前对该植物的研究较少.我们对透骨草进行了化学成分研究，从中分离得到了4 个化合物，经鉴定为Ⅰ透骨草灵 （phrymarolin-Ⅰ），Ⅱ熊果酸（Ursolic acid）Ⅲ豆甾醇（Stigmasterol）,Ⅳ透骨草脂C,其中化合物Ⅲ ，Ⅳ为首次从该植物中分离得到. 化合物Ⅳ为一新的木脂素。
　　
　　1 仪器与材料
　　
　　Bruker Avance 600 型核磁共振仪（TMS 为内标），测定溶剂为CDCl3 , DMSO;柱层析硅胶(200-300 目):青岛海洋化工厂生产;透骨草由成都中医药大学峨嵋学院闵伯清老师采于峨眉山市黄湾乡龙门六组林下,经成都中医药大学生药教研室严铸云教授鉴定为透骨草科透骨草（Phryma leptostachya L.var.asiatica hara）的干燥全草.
　　
　　2 提取分离
　　
　　透骨草根（1KG），经粉碎，乙醇回流提取，乙醇减压弄缩至无醇味，得浸膏130g,硅胶（200-300 目）柱层析，以石油醚:醋酸乙酯（6:1）进行梯度洗脱，得到化合物Ⅰ(43mg)，Ⅱ(21mg)，Ⅲ（11mg）。合并26-30 号以石油醚:丙酮（6:1）进行梯度洗脱，再经过重结晶得化合物Ⅵ（170mg）。
　　
　　3 结构鉴定
　　
　　化合物Ⅰ:白色针晶,1H-NMR(CDCI3)δppm:7.03, 6.82, 6.52, 6.51(each 1H,s,Ar-H), 5.95,5.90(2Hx2,d,O-CH2-O), 5.68(1H,s), 4.88(1H,d,J=7Hz), 4.60(1H,d,J=11Hz), 4.39(1H,q,J=7,9Hz),4.04(1H,q,J=2,9Hz), 3.83(1H,), 3.76,3.73(2×3H, -OCH3), 2.91(1H,t), 2.16(3H,ROCOCH3).波谱数据与文献报道[3]的透骨草灵的数据一致，故确定该化合物为透骨草灵（phrymarolin-Ⅰ）.
　　化合物Ⅱ:无定形白色粉末, 1H-NMR(CDCI3)δppm:
　　5.27(1H,d,J=4.8HZ,H-12),3.26(1H,m,H-3), 2.22(1H,d,J=11.6HZ,H-18), 1.10(3H,s,23-CH3),1.00(3H,s,27-CH3), 0.95(3H,s,26-CH3), 0.92(3H,s, 25-CH3), 0.88(3H,d,J=6.4HZ,30-CH3),0.86(3H,d,J=6.0HZ,29-CH3), 0.78(3H,s,24-CH3). 13C-NMR (CDCI3) δppm:39.0(C-1), 27.2(C-2),78.0(C-3), 38.3(C-4), 55.2(C-5), 18.3(C-6), 32.7(C-7), 39.9(C-8), 47.7(C-9), 36.5(C-10),23.3(C-11), 125.6(C-12), 137.9(C-13), 41.6(C-14), 28.0(C-15), 24.1(C-16), 52.6(C-18),38.8(C-19), 38.6(C-20), 30.6(C-21), 36.7(C-22), 28.9(C-23), 15.6(C-24), 15.5(C-25), 17.0(C-26),22.6(C-27), 180(C-28), 17.1(C-29), 21.2(C-30) .波其余谱数据与文献报道[4]的熊果酸的数据一致，故确定该化合物为熊果酸.
　　化合物Ⅲ:白色针晶, 13C-NMR(CDCI3) δppm: 37.2(C-1), 31.8(C-2), 71.8(C-3) , 42.3(C-4),140.7(C-5), 121.7,(C-6), 31.8(C-7), 31.9(C-8), 50.1(C-9), 36.5(C-10), 21.1(C-11), 39.7(C-12),42.3(C-13), 56.8(C-14), 24.3(C-15), 28.9(C-16), 55.9(C-17), 12.3(C-18), 19.4(C-19), 40.5(C-20),21.2(C-21), 138.3(C-22), 129.2(C-23), 51.2(C-24), 31.9(C-25), 19.0(C-26), 21.2(C-27), 25.4(C-28 ), 11.8(C-29). 波谱数据与文献报道[5]的豆甾醇的数据一致，故确定该化合物为豆甾醇.
　　化合物Ⅵ：白色无定形粉末，[α]aD=-139.2（c,0.007 CHCl3）,UVλmax(236nm,272nm) ,经TOFHRMSES+检测，理论值[M+Na]+为495.1267, [M+Na]+为495.1275 ，由此确定分子量为472.结合氢谱和碳谱共同确定分子式C24H24O10.IR(KBr)cm-1:2944 ,2885 ,1744 ,1631 ,1609 ,1472 ,1435 ,1369 ,1342, 1262 ,1218 ,1128 ,1066 , 974 , 929 , 813 , 756 , 由1744cm-1 表明分子结构内含有酯 。氢谱高场区给出两个甲氧基的单峰(δ3.93,s 6H),一个甲基的单峰δ1.61(3H,S)由Hδ6.00-5.95（4H,s×4，），可知分子中有O O×2 的结构。芳环区存在2 个邻位耦合δ6.50 (1H,d, J=8.2HZ ),δ6.59 (1H,d,J=8.1HZ) , δ6.78 (1H,d, J=8.1HZ), δ6.84(1H,d,J=8.0HZ)。经结合氢谱和碳谱及相关文献共同确化合物的骨架为双骈四氢呋喃型木脂素。
　　HMBC 中，H7 与C6,C1 有远程耦合，H6 与C7 有远程耦合，因此确定呋喃环与苯环连接的位置。具体结构。双骈四氢呋喃类木脂素，在天然产物中其两个四氢呋喃环一存在的以顺式骈合[6]。NOESY 中，H8’与H7’,H9’β，H9α 有相关暂定，H7 与H9’β，H9α 有相关,因此确定H8’与H7, H7’，H9’β，H9α 在同侧。具体结构氢谱与碳谱具体数据.
　　综上所述， 化合物Ⅵ 被鉴定为hexahydro-1,4-bis(4-methoxybenzo[d][1,3]dioxol-5-yl)furo[3,4-c]furan-3a-yl acetate，命名为透骨草酯C.

　　
　　[参考文献] (References)
　　[1] 黄泰康,丁志遵,赵守训等,现代本草纲目[K].北京:中国医药科技出版社,2001:934.
　　[2] 王小芳，植物杀虫剂的研究进展[J].广州：广州化工，2009,37(8):42.
　　[3] Ishibashi, Fumito; Taniguchi, Eiji. Synthesis and absolute configuration of the acetalic lignan (+)-phrymarolinI. Bulletin of the Chemical Society of Japan ,1988, 61(12),:4361-6.
　　[4] 赵庆春,付艳辉,等.胡蔓藤中非生物碱类化学成分的分离与鉴定[J].沈阳:沈阳药科大学学报,2007.24(10 ):620-622.
　　[5] 郭澄,郑清明,郑汉臣.元宝草的化学成分研究[J].上海:药学服务与研究,2005.5(4):341-344.
　　[6] 徐任生、叶阳、赵维民，天然产物化学（第二版）[M]，科学出版社，北京，2004,9:631。