基于喘咳平颗粒中三味中药的薄层鉴别
喘咳平颗粒为医院制剂，是在临床经验方基础上，根据中医辨证施治原理并结合现代药效学试验严格筛选所得的现代方剂。此方经临床应用观察，具有清热化痰，平喘止咳的功效，主要用于治疗由痰热壅肺所致喉中哮鸣有声、胸膈烦闷、气促息涌、喘咳阵作、痰黄粘稠等症，疗效确切，毒副作用小。现对方中药材麻黄、黄芩和丹参进行薄层色谱鉴别，方法简单、灵敏、重现性好，可用作本品的质量控制项目。
1 材料及来源
1.1 对照品与试剂
盐酸麻黄碱（中国药品生物制品检定所，171242-200405），黄芩苷（中国药品生物制品检定所，110715-200815），丹参酮ⅡA（中国药品生物制品检定所，110766-200416）； 硅胶G（青岛海浪硅胶干燥剂厂，090401）；羧甲基纤维素钠（成都市联合化工试剂研究所，060814）； 其他试剂为分析纯。
1.2 样品
喘咳平颗粒及阴性对照样品均由医院实验室提供。
1.3 薄层板制备
取硅胶G粉适量，用约3倍量体积的0.5％羧甲基纤维素钠溶液稀释并研匀，手工铺板。薄层板自然晾干后于恒温箱中105℃活化0.5h，取出，置干燥器中贮存，备用。
2 鉴别
2.1 麻黄的薄层鉴别
2.1.1 对照品溶液的制备
取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成浓度为1mg/1ml 的溶液，作为对照品溶液。
2.1.2 供试品溶液的制备
取喘咳平颗粒4g，加浓氨试液数滴，再加三氯甲烷30ml，超声提取30 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml 使溶解，作为供试品溶液。
2.1.3 阴性对照溶液的制备
按处方组成量，取除麻黄外的其余药味，按工艺要求制成不含麻黄的喘咳平颗粒，照供试品溶液制备方法操作，制得麻黄阴性对照溶液。
2.1.4 展开系统的选择
分别吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液2μl、5μl、5μl，点于同一硅胶G 薄层板上，分别以三氯甲烷-甲醇-氨水（20：5：0.5）为展开系统Ⅰ[1]，正丁醇-冰醋酸-水（8：2：1）为展开系统Ⅱ[1]，预饱和30 分钟后展开，取出，晾干，喷以0.5%茚三酮溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同的红色斑点，而阴性对照色谱在相应位置上无干扰。
可知，在两种展开系统中麻黄的斑点均能得到较好的分离，但系统Ⅱ较系统Ⅰ图谱更为清晰，因此选择系统Ⅱ，即正丁醇-冰醋酸-水（8：2：1）为喘咳平颗粒质量标准中麻黄的薄层鉴别正文展开系统。
2.2 黄芩的薄层鉴别
2.2.1 对照品溶液的制备
取黄芩苷对照品，加甲醇制成浓度为1mg/1ml 的溶液，作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备
取喘咳平颗粒2.5g，加乙酸乙酯-甲醇（3：1）的混合溶液15ml，加热回流30 分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml 使溶解，取上清液作为供试品溶液。
2.2.3 阴性对照溶液的制备
按处方组成量，取除黄芩外的其余药味，按工艺要求制成不含黄芩的喘咳平颗粒，照供试品溶液制备方法操作，制得黄芩阴性对照溶液。
2.2.4 展开系统的选择
分别吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液3μl、5μl、5μl，点于同一4%乙酸钠-硅胶G 薄层板上，分别以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5：3：1：1）为展开系统Ⅰ[2]，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸-甲醇（7：3：1：1）为展开系统Ⅱ[3]，预饱和30 分钟后展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，置可见光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同的深绿色斑点，而阴性对照色谱在相应位置上无干扰。见图2。
由图2 可知，在两种展开系统中黄芩的斑点均能得到较好的分离，但系统Ⅰ较系统Ⅱ图谱更为清晰，因此选择系统Ⅰ，即乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5：3：1：1）为喘咳平颗粒质量标准中黄芩的薄层鉴别正文展开系统。
2.3 丹参的薄层鉴别
2.3.1 对照品溶液的制备取丹参酮ⅡA 对照品，加乙酸乙酯制成浓度为2mg/1ml 溶液，作2.3.2 供试品溶液的制备取喘咳平颗粒10g，加乙醚50ml，避光超声提取30 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5ml 使溶解，作为供试品溶液。
2.3.3 阴性对照溶液的制备
按处方组成量，取除丹参外的其余药味，按工艺要求制成不含丹参的喘咳平颗粒，照供试品溶液制备方法操作，制得丹参阴性对照溶液。
2.3.4 展开系统的选择
分别吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液5μl、15μl、15μl，点于同一硅胶G 薄层板上，分别以苯-乙酸乙酯（19：1）为展开系统Ⅰ[1]，甲苯-乙酸乙酯（19：1）为展开系统Ⅱ[4]，预饱和30 分钟后展开，取出，晾干，置可见光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同的暗红色斑点，而阴性对照色谱在相应位置上无干扰。
可知，在两种展开系统中丹参的斑点均能得到较好的分离，但系统Ⅱ较系统Ⅰ边缘效应小，因此选择系统Ⅱ，即甲苯-乙酸乙酯（19：1）为喘咳平颗粒质量标准中丹参的薄层鉴别正文展开系统。
3 讨论
针对喘咳平颗粒中麻黄的鉴别，本实验除考察了上述两种的展开系统外，还参照2005年版《中国药典》中含麻黄的成方制剂鉴别方法，考察了三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（20：3.5：
0.5）、三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（5：1：0.1）、环己烷-三氯甲烷-乙醇（1：3：1）、正丁醇-冰乙酸-水（8：1：1）等展开系统。结果表明，采用硅胶G薄层板，以正丁醇-冰醋酸-水（8：2：1）为展开剂，0.5%茚三酮溶液105℃加热至斑点显色清晰所得麻黄薄层图谱分离效果好、边缘效应小、阴性无干扰，且方法简单易操作。
对于喘咳平颗粒中黄芩的鉴别，本实验还依据文献分别采用硅胶G板、4%乙酸钠-硅胶G板和聚酰胺薄膜考察黄芩不同的展开系统[1，5～6]：甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（10：3：1：2）、乙酸乙酯-甲醇-甲酸（8：1：1）、乙酸、36%乙酸、三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（9：1：
1：2），以及不同的显色方法：可见光检视、紫外光灯下（365nm）检视、以及1%、2%和5%三氯化铁乙醇溶液显色等。结果表明采用4%乙酸钠-硅胶G薄层板，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5：3：1：1）为展开剂，5%三氯化铁乙醇溶液显色所得黄芩薄层图谱分离效果好、边缘效应小、阴性无干扰，且方法简单易操作。
由于丹参酮ⅡA含量较低、不稳定、薄层鉴别点样量大等特点，在喘咳平颗粒丹参鉴别方法的研究中，通过对样品提取方法（振摇后避光放置、避光超声）、溶剂体积（乙醚20ml、30ml、40ml、50ml）及提取时间（10分钟、20分钟、30分钟、60分钟）进行比较，得出供试品溶液最优制备方法为：取本品10g，加乙醚50ml，避光超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解。
综上表明，实验所得定性鉴别方法对喘咳平颗粒中麻黄、黄芩和丹参的鉴别专属性较强，提取方法、展开系统对其分离效果理想，重现性好，且阴性无干扰，可以用作该制剂的质量控制内容。